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安捷伦1260液相色谱 操作流程
发布时间:2019-08-16   点击次数:3609次

安捷伦1260液相色谱 工作站的详细操作方法

 

一、开机:

1、打开电脑;

2、打开液相色谱各个模块的电源;

3、双击桌面“LC1260(Online)”,进入联机界面;

二、排气:

1、手动旋开泵处冲洗阀(逆时针旋转约1圈)

2、右键单击“Pump”图标区域,选择“Method”选项,进入泵编辑画面,设流速:5ml/min,点击“确定”;

3、右键单击“Pump” 图标区域,点击“Control”选项,选中“ON”,点击“确定”,则系统开始冲洗,直到

管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止(一般为5分钟),切换通道继续冲洗,直到所有要用通道

无气泡为止;

4、右键单击“Pump” 图标,点击“Method”选项,设流速:0ml/min,手动旋紧冲洗阀;

5、右键单击“Pump”图标,点击“Method”选项,按照方法要求选择合适比例的流动相,设流速:1.0ml/min;(不一定是1);

6、同理右键单击“Column Comp”,“DAD”图标,点击“Method”选项,按照;

7、方法的要求设置温度,波长,点击“控制” 选项,“ON”打开柱温箱和检测器;

三、编辑方法:

1、点击“Method”—— “Edit EntireMethod”开始编辑完整方法;

2、选中除“Data Analysis ”外的三项,进入下一选项卡,选择“Als”(自动进样),点击“OK”,进入下一选项;

3、选择“Method”菜单下“Method Information”选项,在“Method Comments”中加入方法的信息(如:

This is for test!),选择“OK”,进入下一选项;

4、泵参数设定:右键单击“Pump”图标,点击“Method…”选项,设置“Flow”:如1.0ml/min;“Stop 

Time”:如10 min(该停止时间仅为做一个样品需要的时间),按照要求选择合适比例的流动相配

比,选择“OK”,进入下一选项;

5、自动进样器参数设定:右键单击“Sampler”图标,点击“Method”选项,选择“Injection volume”,输

入进样体积,选择“OK”,进入下一选项;

6、柱温箱参数设定:右键单击“Column Comp”,点击“Method”选项,设置“Left”温度(可设置温度范

围:低于室温10℃-80℃),一般“Left”和“Right”温度一致,选择“Combined”绑定即可,“Stop 

Time”选择“As Pump /Injector”,选择“OK”,进入下一选项;

7、UV检测器参数设定: 右击“DAD” ,点击“Method…”选项,下方的空白处输入所需的检测波长(可

根据需要选择多个波长,多可选8个波长);“Stop Time”选择“As Pump /Injector”;“Spectrum” 

——“Store”选项下,根据需要选择 “None”或“All(全波长扫描)”等选项,选择“OK”,进入下一选

项;

8、编辑方法完毕,从“Method”菜单中,选中“Save Method As”,输入一方法名,选择“OK”,保存方

法成功。

9、单针进样

10、从“Run Control”菜单中,选择“Sample Information”选项,输入“Operator Name”;在“Data File”中

选择“Path”和 “Prefix/Counter(文件命名)”设置“Prefix(一般设置为年月日)”和“Counter”;输

入“Location(样品位置)”和“Sample Name”,选择“OK”,进入下一选项;

11、基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Method”选项,开始进样。

四、序列进样:

1、选择“Sequence”菜单下“ Sequence Table”选项,在“Confiqure Table”中选择需要选项,一般

为“Vial(样品瓶)”,“Sample Name(样品名称)”,“Method Name(方法名称)”,“Inj/Vial(进样次

数)”,“Sample Type(样品类型)”,“Datafile(文件名)”和“Inj Volume(进样体积)”;

2、点击“Inset”生成一行,设置上述参数,选中该行,点击“Copy”和“Paste”复制后修改相应参数,即

生成序列表,选择“OK”,进入下一选项;

3、点击“Sequence”菜单下“ Sequence Parameters”选项,选择序列数据的“Path”(序列会自动生成

以“序列名称-时间”为名称的文件夹保存数据),数据建议选择 “Prefix/Counter”保存;

在“Shutdown”选项下选中“Post-Sequence Command/Macro”,根据需要选择“PUMPALL OFF(序列

结束后关闭泵)”” “LAMPALL OFF(序列结束后关闭紫外灯)”” “STANDBY(序列结束后关闭紫外灯

和泵)”,选择“OK”,进入下一选项;(注:若“Path”中默认保存于C盘,则可点击“View”,选

择“Preferences”,根据需要添加相应的“SequenceTemplates”“Data”“Master Methods”保存路径)

4、从“Sequence”菜单,选中“Save Sequence Template As”,输入一序列名,选择“OK”,即可;

5、基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Sequence”选项,开始序列进样。

(注:若中途停止运行,则选择“Run Control”中的“Stop Run/Inject/ Sequence”可保留图谱信息,若选

择Abort,则所有图谱信息都丢失)

五、数据分析(脱机状态使用):

1、双击“LC1260(Offline)”图标进入的脱机画面

2、从“View”菜单中,点击“Data Analysis”进入数据分析画面

3、从“File”菜单选择“Load Signal”,选中所需的数据文件名,点击“OK”,则数据被调出。

4、谱图优化:从“Graphics”菜单中选择“Signal Options”。从“范围” 中选择“Full”或“Use Ranges” 选择

所需“Time Range”和“Response Range”,选择“OK”;从“Integration”中选择“Integration Events”,调

整“Area Reject”和“Height Reject”删除杂峰;点击“Set Integration”图标,可选择性消除不需要的积

分,若想消除该操作,则选择“Method Manual Events”上排左起第5个图标进行移除操作即可,点击

左边“√”图标,将积分参数存入方法并退出“Integration Events”。

(注:“Set Integration”图标为)

六、标准曲线绘制:

1、选择“Calibration”菜单下“New Calibration Table”,选择“Automatic Setup”中“Level(即标曲中对应

的点,个点即为1)”和“Defanlt Amount(标准品对应点的浓度)”,选择“OK”;

2、通过选择“Calibration”菜单下的“Add Level”选项依次添加各点参数,若为外标法,在“ISTD”项下

选“NO”,若为内标法则选“Yes”;“#”项下对应标准品和内标无的数字的应统一;若想更改标准曲线中

的对应点;

3、选择“Calibration”菜单下的“Recalibrate”项的“Mode”选项,选择“Average”则表示取当前点与标曲

中对应点的平均值替代标曲中原对应点,若选择“Replace”则表示将当前点取代标曲中对应点;

(注:修改“Defanlt Amount”中浓度单位的方法:选择“Calibration”项下“Calibration Setting”,修

改“Amount Units”,设置浓度单位;选择“Calibration”项下“Calibration Setting”,修改“Default 

CalibrationCurve”,选择合适的曲线类型-Type,是否过原点-Origin和各点对于标准曲线的比重-

Weight,通常选Equal)

4、调出样品谱图,点击需要计算浓度的色谱峰,选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选

择“Report style”为“Detail”,点击“OK”后选择“打印预览”图标,在报告中即可体现计算结果。

七、 图谱重叠设置:

1、选择“File”菜单下“Overlay Signal”选项,选择任意需要重叠的图谱;

2、在“Signal”选项下,选择“3D Signal Overlay”图标(紧邻图谱上方左起第四个图标),在弹出

的“Adjust Signal OverlayOptions”对话框中调节交错时间和高度;若想移除重叠谱图,点击第六个图

标。

八、信噪比等参数计算:

1、选择“Report”菜单中的“System Suitability”项下的“Edit Noise Range”选项,设置时间范围(超过

1min);

2、选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选择“Report style”为“Perfomance+Noise”,点

击“OK”后,即可预览信噪比参数;

3、选择“Report” 菜单中的“Specify Report”,选择“Report style”为“Extended Perfomance”,点

击“OK”后,即可预览对称性、拖尾因子等所有参数。

九、程序运行时检测出峰情况:

选择“File”菜单下的“Snapshot”选项即可。

十、打印报告:

1、从“Report”菜单中选择“Report Mode”,选择“Use Classic Reporting”;

2、从“Report”菜单中选择“打印报告”,则报告结果将被打印。

十一、关机:

1、冲洗色谱柱和系统后,退出化学工作站及其它窗口,关闭计算机;

2、关闭Agilent 1260各模块电源开关。

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