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蛋白快速染色液(免脱色)用户指南

更新时间:2025-04-10      点击次数:161

蛋白快速染色液(免脱色)用户指南

产品概述

蛋白快速染色液(免脱色)是一款专为科研工作者设计的高效蛋白质染色试剂。该产品显著缩短了传统蛋白染色流程所需的时间,同时省略了繁琐的脱色步骤,在保证高灵敏度和分辨率的前提下,极大地提高了实验效率,适用于 SDS - PAGE(十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳)等多种蛋白分离凝胶的染色分析。

技术原理

本染色其中的染色成分能够特异性地与蛋白质分子结合。在染色过程中,染色剂通过静电作用、疏水作用以及范德华力等多种分子间作用力,迅速且牢固地附着于蛋白质条带之上。与传统染色方法不同的是,该染色液中的添加剂能够抑制背景染色,使得蛋白质条带在凝胶背景中清晰呈现,无需额外的脱色步骤来去除背景杂色,从而实现快速、高对比度的染色效果。

产品特点

00001. 快速染色:相较于传统染色方法数小时甚至过夜的染色时间,本染色液可大大节省实验时间。

00001. 免脱色:创新配方使染色过程中背景染色得到有效控制,无需后续脱色操作,避免了因脱色过度或不足对实验结果造成的影响,同时减少了实验操作步骤和试剂消耗。

00001. 高灵敏度:能够检测到的蛋白质含量,可清晰分辨出不同分子量的蛋白质条带,满足科研对微量蛋白检测的需求。

00001. 兼容性强:适用于各种常见的聚丙烯酰胺凝胶浓度,包括不同比例的分离胶和浓缩胶,且与多种蛋白样品制备方法兼容。

使用方法

染色前准备

00001. 完成 SDS - PAGE 电泳后,小心取出凝胶,放入合适的染色容器中。建议使用塑料或玻璃容器,避免使用金属容器以防染色液发生化学反应。

00001. 准备适量的蛋白快速染色液。根据凝胶的大小和数量,按照每平方厘米凝胶面积使用比例进行准备。

染色步骤

00001. 将准备好的蛋白快速染色液缓慢倒入装有凝胶的容器中,确保凝胶浸没在染色液中。染色液应覆盖凝胶表面以保证染色均匀。

00001. 将容器置于水平摇床上,设置转速,在室温下染色。染色过程中,染色液中的成分会逐渐与蛋白质结合,蛋白质条带将开始显现。

结果观察与记录

00001. 染色完成后,直接将凝胶从染色液中取出,置于凝胶成像系统或透射式紫外分析仪下观察。此时,蛋白质条带应清晰可见,背景干净。

00001. 使用凝胶成像软件对结果进行拍照记录。调整合适的曝光时间、对比度和亮度等参数,以获取清晰、准确反映蛋白质条带信息的图像。建议保存原始图像文件,以便后续分析。

注意事项

00001. 染色液具有一定的腐蚀性,使用时需佩戴手套、护目镜等防护装备,避免皮肤和眼睛直接接触。如不慎接触,应立即用大量清水冲洗,并及时就医。

00001. 染色液应避光保存于 4℃冰箱中,使用前需恢复至室温。避免反复冻融,以免影响染色效果。

00001. 不同品牌和批次的凝胶可能对染色效果有轻微影响。若使用新的凝胶产品,建议进行预实验以优化染色条件。

00001. 染色后的凝胶和剩余染色液应按照实验室化学废弃物处理规定进行妥善处理,避免对环境造成污染。

常见问题及解决方法

00001. 染色条带不清晰:可能原因是染色时间不足或染色液浓度过低。可适当延长染色时间,或按照说明书比例增加染色液浓度后重新染色。

00001. 未检测到目标蛋白条带:检查蛋白上样量是否过低,可适当增加上样量并重做实验。同时确认目标蛋白是否表达异常,可通过其他方法如 Western blot 进行验证。

通过正确使用本蛋白快速染色液(免脱色),科研人员能够高效、准确地对蛋白质进行染色分析,为科研工作提供有力支持。



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