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蛋白胨(Peptone)用户指南

更新时间:2025-04-17      点击次数:166

蛋白胨(Peptone)用户指南

——微生物培养基核心成分的专业解析

一、产品概述

蛋白胨(Peptone)是一种由动物组织(如牛肉、酪蛋白)或植物蛋白(如大豆)经酶解或酸水解制备的氮源物质,广泛用于微生物培养基的配制。其核心功能包括:

  • 提供氮源:为微生物生长提供氨基酸、多肽及小分子肽类。

  • 促进生长:含维生素、矿物质等微量成分,加速菌体代谢。

  • 增强适应性:不同来源的蛋白胨可优化特定菌株的生长环境。

二、分类与特性


类型原料来源适用场景特点
动物源蛋白胨牛肉、猪骨细菌、真菌培养(如大肠杆菌、酵母)氨基酸组成丰富,含维生素B族
植物源蛋白胨大豆、小麦乳酸菌、植物内生菌培养低过敏原性,适合植物共生菌研究
酪蛋白胨牛奶酪蛋白分子生物学实验(如质粒转化)纯度高,批次间稳定性强
胰蛋白胨动物胰酶水解高要求微生物(如支原体、衣原体)富含支链氨基酸,促进细胞膜合成


三、技术参数


指标标准值检测方法
总氮含量≥12.0%凯氏定氮法
氨基酸含量≥8.0%高效液相色谱法(HPLC)
灰分≤5.0%灼烧法
pH值(1%水溶液)6.5-7.5电位滴定法
溶解性全溶,无沉淀目视观察


四、操作指南

  1. 培养基配制

    • 按配方比例称取蛋白胨(如LB培养基:10 g/L蛋白胨),加入蒸馏水搅拌溶解。

    • 调节pH至目标值(如7.0±0.2),121℃高压灭菌20分钟。

  2. 无菌操作

    • 灭菌后培养基需在超净台内分装,避免二次污染。

    • 固体培养基冷却至50-55℃时倒平板,防止冷凝水过多。

  3. 储存条件

    • 未开封的蛋白胨需密封保存于干燥阴凉处,避免吸潮结块。

    • 开封后建议分装,4℃冷藏保存,有效期6个月。

五、应用场景

  • 微生物发酵:作为氮源用于抗生素(如青霉素)、氨基酸(如谷氨酸)的生产。

  • 分子生物学:在LB、SOB等培养基中促进质粒扩增和转化效率。

  • 食品微生物检测:用于沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的分离培养。

  • 环境科学:研究土壤微生物群落对不同氮源的响应。

六、质量验证

  1. 微生物生长测试

    • 在LB培养基中接种大肠杆菌(E. coli),37℃培养12小时后,菌落直径应≥2 mm。

  2. 氨基酸谱分析

    • 使用HPLC检测,必需氨基酸(如亮氨酸、异亮氨酸)占比≥30%。

  3. 无菌验证

    • 按《中国药典》2020版要求,37℃培养7天,无菌生长。

七、注意事项

  1. 原料溯源

    • 动物源蛋白胨需确认原料无疯牛病(BSE)风险,植物源需避免转基因成分。

  2. 批次一致性

    • 长期实验建议使用同一供应商的同一批次产品,减少实验误差。

  3. 替代方案

    • 对高成本实验,可尝试酵母提取物(Yeast Extract)部分替代蛋白胨(比例1:1)。

八、常见问题解答

  • Q:蛋白胨结块是否影响使用?
    A:轻微结块可微波低火加热溶解,严重结块需更换新批次。

  • Q:如何降低培养基泡沫?
    A:减少蛋白胨用量至8 g/L,或添加0.1%消泡剂(如聚二甲基硅氧烷)。

  • Q:蛋白胨与水解酪蛋白(Casein Hydrolysate)的区别?
    A:蛋白胨为多肽混合物,水解酪蛋白为更小分子肽,适合不同菌株需求。

九、供应商信息

  • 推荐品牌:Oxoid、BD Difco、青岛海博生物

  • 检测标准:符合USP、EP、CP药典要求

  • 技术支持:提供氨基酸谱分析报告及微生物生长验证数据



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