摘要:本文为科研人员提供赛澳美SA201.02—Cellmax胎牛血清的详细用户指南。涵盖产品概述、特性、应用场景、使用方法、储存与运输、质量控制、常见问题解答等内容,助力科研人员高效使用该产品。
关键词:赛澳美;Cellmax胎牛血清;用户指南
在细胞培养等生物医学研究领域,胎牛血清作为一种重要的细胞培养补充剂,为细胞生长提供了丰富的营养物质和生长因子。赛澳美SA201.02—Cellmax胎牛血清以其优质的品质和稳定的性能,在科研市场中占据重要地位。本文旨在为科研人员提供一份专业且易懂的使用指南,帮助大家更好地了解和使用该产品。
品牌:赛澳美(Cellmax)
产品名称:胎牛血清FETAL BOVINE SERUM
货号:SA201.02
规格:500ml
储存条件:-10°C或以下
该产品血源为澳洲安格斯牛混合蒙古三和牛,采自中国本土,具有稳定和充足的原料储备。其原料血部分来自澳大利亚,澳大利亚是世界上被欧盟科学指导委员会认定的少数疯牛病非疫区国家之一,且采取了畜产品识别追踪系统,血清品质和安全性得到保证。
多级过滤:采用进口血清生产线,使用多级高置留膜过滤和3次0.1μm终端微滤方法,有效杜绝血清中支原体污染。
灭菌处理:除了3次0.1μm的过滤,还增加了γ射线辐照灭菌灭支原体工艺,确保工业等级规模细胞培养的安全性。
产品采用进口的、在美国FDA备案的生产厂家生产的食品级PETG材料,利用先进的注塑成型工艺生产而成PETG瓶,保证血清在储存和运输过程中的质量稳定。
外观检查:浅黄色澄清稍粘稠的液体,无溶血或异物。
理化指标:pH值7.00 - 8.00;蛋白质含量3.0 - 4.5g/ml;细菌内毒素<10Eu/ml;血红蛋白含量<30mg/dl;渗透压摩尔浓度280 - 360mOsmol/kg。
微生物检测:无菌检查阴性;支原体检测阴性;病毒检测(包括牛病毒性腹泻病毒、牛腺病毒、牛细小病毒等多种病毒)均为阴性。
细胞培养性能:CHO细胞、VERO细胞、MRC - 5细胞接种浓度分别按3×10³细胞/mL、6×10³细胞/mL、1×10⁴细胞/mL,每24h计数,绘制生长曲线,倍增时间不得低于对照标准品倍增时间的90%;贴壁率V79细胞≥70%,CHO - K1细胞≥60%;体外连续培养5代,每代48小时均能形成致密单层,且形态正常。
适用于绝大多数常用的原代细胞(如淋巴细胞、内皮细胞、肌肉细胞、成纤维细胞、神经细胞)、基因改造细胞(如杂交瘤细胞)、肿瘤细胞、异倍体细胞等的培养。
在生物制药领域,可用于疫苗生产、单克隆抗体生产等过程中细胞的扩增和培养,为药物研发提供稳定的细胞来源。
在干细胞研究、组织工程等再生医学领域,胎牛血清能够为干细胞提供良好的生长环境,促进干细胞的增殖和分化。
将血清从冷冻箱取出后,先置于2 - 8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。避免直接将血清置于37℃水浴中快速解冻,因为温度变化过大容易导致血清中形成沉淀物。
如一次无法用完一瓶血清,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。避免反复冻融,以免降低因子活性。
血清通常是以2% - 20%的比例加到基础培养基中,混合后配成培养基。具体最佳浓度需要根据实验设计来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。
准备培养皿和所需培养液,将培养皿放入无菌工作台中。
向培养皿中加入适量的培养液,并注意避免产生气泡。
加入适量的胎牛血清,注意不要加入过多以免影响细胞的生长。
将细胞悬液加入培养皿中,将其放入培养箱中进行培养。
推荐在-20℃以下储存血清,若存放于4℃时,请勿超过一个月。长时间储存在2 - 8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊,但一般不会影响产品性质。
在运输过程中,应确保血清始终处于冷冻状态,可使用干冰等冷冻介质进行运输,以防止血清在运输过程中变质。
与国内大部分的合规牧场签有长期的合作协议,并在牧场建立有自己的采血基地,拥有稳定和充足的原料储备。对原料血进行严格的检测,确保血源的安全性和质量。
采用国际标准的血清生产线,设备均为美国,生产工艺采用大容量真混合技术,批产量可达2000 - 2500升,年产量可达500000升。生产过程严格按照相关标准和规范进行操作,确保产品质量稳定。
每批产品都进行全面的质量检测,包括外观检查、理化指标检测、微生物检测和细胞培养性能检测等,只有检测合格的产品才能出厂销售。
解冻血清时,若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),非常容易产生沉淀物。此外,血清中的各种蛋白和脂蛋白在长时间储存在2 - 8℃时也可能聚集而形成沉淀。大多数情况下,轻轻摇动沉淀并加热至37℃沉淀会再溶解。要除去沉淀,可离心血清(400g,1 - 2分钟)或者让其沉淀在瓶子底部,将血清小心地转移到另一个无菌瓶里。
加热可以灭活补体系统,但在免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,一般推荐使用热灭活血清。然而,实验显示经过正确处理的热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的,经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。因此,除非实验设计有特殊要求,一般不建议对血清进行热灭活处理。
在-20℃以下储存的血清,其保质期一般为2 - 3年。但在储存过程中,应定期检查血清的质量,如发现血清出现变色、变质等情况,应立即停止使用。
赛澳美SA201.02—Cellmax胎牛血清以其严格的生产工艺、优质的包装材料、全面的质检标准和广泛的应用场景,为科研人员提供了可靠的细胞培养补充剂。通过遵循本用户指南中的使用方法、储存与运输要求以及质量控制措施,科研人员可以充分发挥该产品的优势,提高细胞培养的成功率和细胞的健康状态,为生物医学研究提供有力的支持。希望本指南能够帮助用户更好地了解和使用该产品,取得更好的科研成果。