1631112——伯乐Bio-Rad 40% BioLyte® 3/10 两性电解质

1631112——伯乐Bio-Rad 40% BioLyte® 3/10 两性电解质用户指南

——为等电聚焦（IEF）提供宽pH范围线性梯度支持

一、产品概述

伯乐Bio-Rad 40% BioLyte® 3/10 两性电解质（货号：1631112）是一种高纯度、澄清水溶液形式的两性电解质载体，专为等电聚焦（IEF）技术设计。其核心功能是通过 可逆质子化/去质子化 形成稳定的线性pH梯度，帮助分离等电点（pI）差异微小的蛋白质。该产品以 40%浓度、10 mL规格 提供，pH范围覆盖 3.5–9.5，适用于宽跨度蛋白质组学研究。

二、核心参数与特性

产品优势：

1. 宽pH梯度：覆盖多数蛋白质的pI范围，适用于初步分离。

2. 高重复性：线性梯度稳定，确保实验结果一致性。

3. 兼容性强：与ReadyStrip™ IPG胶条、Bio-Rad电泳系统无缝集成。

4. 纯度高：不含DNase和RNase，避免核酸污染。

三、应用场景

1. 蛋白质组学研究

• 分离血清、细胞裂解液等复杂样本中的蛋白质，为疾病机制研究提供数据支持。

2. 单克隆抗体纯化

• 在生物制药中用于抗体等电点分离，提高纯化效率。

3. 疾病标志物检测

• 助力医疗卫生领域蛋白质标志物筛查，提升诊断准确性。

4. 污染物降解酶分离

• 在环保领域用于分离具有特定降解活性的酶类。

四、操作指南

（一）样本准备

1. 样品类型：

• 蛋白质溶液、细胞裂解液、血清、组织匀浆等。

2. 预处理：

• 确保样品无沉淀，pH值接近中性（7.0–8.0）。

（二）IEF实验流程

1. 胶条预处理：

• 将ReadyStrip™ IPG胶条（如pH 3–10）在平衡液中浸泡10–15分钟。

2. 样品混合：

• 将样品与BioLyte® 3/10按1:1（v/v）比例混合，总体积不超过胶条承载量。

3. 胶条加载：

• 将混合液均匀涂布于胶条表面，避免气泡。

4. 等电聚焦：

• 被动水化：12小时（20°C）；

• 主动聚焦：3000–8000 Vh（根据胶条长度调整）。

• 使用Bio-Rad PROTEAN® IEF Cell系统，按以下参数运行：

（三）后续处理

1. 平衡：

• 聚焦后，将胶条在平衡液中平衡两次（每次15分钟）。

2. 第二向电泳：

• 将胶条转移至SDS-PAGE凝胶上进行分离。

3. 染色与分析：

• 使用考马斯亮蓝或银染法显影，结合软件分析蛋白质图谱。

五、注意事项

1. 储存条件：

• 开封后需密封保存于2–8°C，避免反复冻融。

2. pH范围选择：

• 若需更高分辨率，可结合窄跨度BioLyte®（如pH 4–6、5–7）进行分段聚焦。

3. 避免污染：

• 使用无菌移液器操作，防止微生物或核酸污染。

4. 设备兼容性：

• 仅适用于Bio-Rad IEF系统及兼容的电泳槽。

5. 废弃处理：

• 使用后的胶条及溶液需按实验室生物废弃物规定处理。