Thermo 89882 Zeba™ 脱盐离心柱用户指南

Thermo 89882 Zeba™ 脱盐离心柱用户指南

一、产品概述

Thermo 89882 Zeba™ 脱盐离心柱是赛默飞世尔科技（Thermo Fisher Scientific）旗下Zeba™系列的核心产品，专为蛋白及生物样品快速脱盐设计。该离心柱采用7K MWCO（分子量截留值）高性能体积排阻色谱树脂，通过离心操作实现高效脱盐，同时保留大分子蛋白，适用于手动或自动液相色谱（LC）前处理流程。

二、技术规格

• 截留分子量（MWCO）：7,000 Da

• 适用体积范围：0.5 mL（单柱容量，支持30–130 µL样品体积）

• 树脂类型：专有高性能体积排阻色谱树脂

• 包装规格：25柱/盒（货号89882）

• 储存条件：4°C保存，常温运输

• 回收率：对>7,000 Da蛋白回收率≥95%，去除≥95%盐及小分子污染物（<1,000 Da）

三、核心功能

1. 高效脱盐

• 通过体积排阻色谱原理，小分子盐类（如NaCl、Tris等）随缓冲液流出，大分子蛋白被树脂截留。

• 兼容高盐浓度（如1 M NaCl）样品，无需稀释。

2. 高回收率

• 专有树脂设计降低蛋白非特异性结合，即使低浓度蛋白（25 µg/mL）仍可保持高回收率。

3. 快速操作

• 单次离心（1,000 × g，2分钟）即可完成脱盐，无需色谱系统或树脂平衡步骤。

• 一张96孔Zeba脱盐板可在5分钟内处理96份样品。

4. 兼容性

• 与主流自动液相色谱系统（如AKTA）兼容，支持手动注射器或自动化工作站操作。

四、操作流程

（一）离心柱预处理

1. 去除储存液

• 掰断柱子尾部并松开盖子，置于15 mL离心收集管中。

• 1,000 × g离心2分钟，弃去收集管中液体。

2. 树脂平衡

• 向柱子中加入1 mL缓冲液（如PBS），1,000 × g离心2分钟，弃去液体。

• 重复此步骤2–3次，确保树脂充分平衡。

（二）样品上样

1. 样品加载

• 将柱子置于新收集管中，缓慢加入30–130 µL样品至树脂中心。

• 可选压层：对于<70 µL样品，样品吸收后加入15 µL超纯水或缓冲液。

2. 离心脱盐

• 1,000 × g离心2分钟，收集管中液体即为脱盐样品。

（三）后续分析

• 脱盐样品可直接用于SDS-PAGE、质谱分析、酶活性测定或液相色谱纯化。

五、常见问题与解决方案

六、应用场景

1. 蛋白质组学：去除样品中高浓度盐类，优化质谱分析结果。

2. 药物研发：快速脱盐后进行药物-蛋白结合研究。

3. 生物制药：缓冲液置换以适应下游纯化工艺。

4. 高通量筛选：结合96孔板实现自动化脱盐。

七、注意事项

1. 储存条件：收到后立即4°C保存，避免树脂干燥。

2. 样品兼容性：适用于>7,000 Da蛋白，小分子蛋白（如肽段）可能被截留。

3. 安全操作：树脂悬液含0.05%，避免接触皮肤或吸入。