Qubit RNA IQ Assay Kit 的检测原理主要基于荧光染料与 RNA 的特异性结合以及对荧光信号的检测,具体如下:
染料与 RNA 特异性结合:试剂盒中的荧光染料能够特异性地结合到 RNA 分子上。这种染料具有特殊的结构和性质,它可以插入到 RNA 的双链区域或与 RNA 的特定结构域相互作用,而且结合的程度与 RNA 的量成正比。
荧光信号产生与检测:当荧光染料结合到 RNA 上后,在特定波长的激发光照射下,染料会被激发并发出荧光。Qubit 仪器能够精确地检测到这种荧光信号的强度。由于荧光信号强度与结合的染料量成正比,而染料量又与 RNA 的量成正比,所以通过检测荧光信号强度就可以准确地测定 RNA 的浓度。
RNA 质量评估:该试剂盒不仅可以检测 RNA 浓度,还能评估 RNA 的质量。它是通过检测不同大小 RNA 片段所产生的荧光信号分布来实现的。例如,完整的核糖体 RNA(rRNA)包括 28S rRNA 和 18S rRNA 等,它们的大小不同。在正常情况下,细胞内的 rRNA 含量相对稳定,且 28S rRNA 与 18S rRNA 的比值也较为固定。当 RNA 发生降解时,rRNA 会断裂成较小的片段,导致 28S rRNA 与 18S rRNA 的比值发生变化,以及 RNA 完整性指数(RIN)改变。Qubit RNA IQ Assay Kit 通过分析荧光信号在不同大小片段上的分布情况,计算出 RIN 值和 28S/18S 比值等参数,从而评估 RNA 的质量和完整性。