TrypLE Express 酶与其他胰酶产品的区别

在细胞培养领域，胰酶类产品常用于细胞解离，但 TrypLE Express 酶与传统胰酶及其他同类产品相比，在多个关键方面存在显著差异。

TrypLE Express 酶属于非动物源性重组酶，它通过受控的发酵工艺制备，整个生产过程不涉及任何动物来源成分。这一特性使其从源头上杜绝了潜在致病污染物引入的风险，比如动物源可能携带的病毒（如猪细小病毒、伪狂犬病毒等，常见于从猪胰腺提取的胰酶中）、朊蛋白等，为细胞培养实验提供了的生物安全性，特别适合对实验环境纯净度和细胞安全性要求严苛的研究，如干细胞研究、基因治疗相关细胞制备等。

传统胰酶大多从动物（如猪、牛）的胰腺组织中提取。这种来源方式使得胰酶产品不可避免地存在动物源污染风险，即使经过多道纯化工艺，仍难以清除潜在的有害病原体，可能对细胞培养造成干扰，影响实验结果的准确性和可重复性，限制了其在一些科研及临床前研究中的应用。

该酶特异性地裂解赖氨酸和精氨酸 C - 末端的肽键，作用位点相对单一且明确。这种特性使其在细胞解离过程中表现出温和的细胞作用特性。因为仅针对特定肽键作用，减少了对细胞表面其他蛋白及细胞内部结构的非特异性损伤。相关实验表明，在处理 Jurkat 细胞时，使用 0.05% 胰蛋白酶处理 20 分钟后，细胞表面 CD2 水平明显降低，而用 TrypLE Express 试剂处理相同时间的细胞，无明显 CD2 损失 ，充分证明其在保留细胞表面表位表达方面的优势。对于依赖细胞表面标志物进行分析、分选、鉴定的实验（如流式细胞术分析、免疫磁珠分选细胞等），TrypLE Express 酶能够更好地维持细胞的生物学特性，保障实验结果的可靠性。

以常见的胰蛋白酶为例，它是一种混合酶，除了具备水解赖氨酸和精氨酸 C - 末端肽键的活性外，还含有其他蛋白酶活性成分，作用机制相对复杂。在细胞解离时，多种酶活性同时作用，虽然能够较快地解离细胞，但容易对细胞造成过度损伤，导致细胞表面蛋白被广泛切割，影响细胞的后续生长、分化及功能。例如在神经干细胞的解离实验中，传统胰蛋白酶处理后的神经干细胞，在后续培养过程中细胞凋亡率明显升高，且分化为神经元和神经胶质细胞的能力受到抑制；而 TrypLE Express 酶解离的神经干细胞不仅保持了较高的细胞活性，在诱导分化后，还能够正常分化为多种神经细胞类型，为神经干细胞的研究及应用提供了更好的细胞基础 。

在实验操作上，TrypLE Express 酶极大地简化了流程。由于其作用位点与传统胰蛋白酶相似，可直接在现有胰蛋白酶使用方案中进行替换，科研人员无需对实验条件进行复杂的优化。而且，该酶仅通过稀释即可实现灭活，无需像胰蛋白酶那样添加血清或胰蛋白酶抑制剂来终止反应。这种特性尤其适用于无血清培养体系，避免了血清成分对实验结果的干扰，同时也降低了实验成本和操作复杂性，让实验操作更加高效、便捷。

传统胰酶在使用后，通常需要添加血清（血清中的抗蛋白酶成分可抑制胰酶活性）或胰蛋白酶抑制剂来终止反应，操作步骤繁琐。血清的加入不仅增加了实验成本，还可能引入外源性物质，干扰细胞培养环境，影响实验结果的准确性。并且，不同批次血清质量存在差异，可能导致实验重复性不佳。此外，添加抑制剂也需要精确控制剂量，否则可能影响细胞状态，进一步增加了实验操作的难度和不确定性 。

TrypLE Express 酶在储存方面具备显著优势。它在室温（15 °C - 30 °C）下可稳定保存 24 个月，也可选择 2 °C - 8 °C 冷藏或 - 5 °C - 20 °C 冷冻保存，运输过程中同样可在室温条件下进行。这种宽泛且稳定的储存条件，不仅释放了实验室有限的低温储存空间，也为实验操作带来极大便利。科研人员无需时刻担忧试剂因储存温度问题而失活，在需要使用时随时可得，有效提升科研效率。

传统胰酶产品对储存条件要求较为苛刻，一般需要低温冷冻保存（-20 °C 甚至更低温度）以维持其活性。频繁的冻融循环会导致酶活性降低，影响实验效果。而且，在运输过程中也需要严格保持低温状态，否则容易造成酶失活，给试剂的采购、储存和使用带来诸多不便，增加了实验室管理成本和实验失败风险 。