常用的蛋白质转印技术有哪些？

半干转印（Semi-dry Transfer）：半干转印是较为常用的蛋白质转印技术之一。该技术是将凝胶和固相基质（如硝酸纤维素膜、PVDF 膜）夹在滤纸中间，不使用转印缓冲液槽，而是直接在滤纸间添加少量转印缓冲液，通过电流驱动蛋白质从凝胶转移到膜上。它的优点在于操作相对简便，所需转印缓冲液量少，转印时间较短，一般在 30 分钟到 1 小时左右，适用于分子量较小的蛋白质转印。不过，由于其电流分布可能不够均匀，对于高分子量蛋白质的转印效果可能不太理想 。

湿转印（Wet Transfer）：湿转印是经典的蛋白质转印方法，将凝胶、膜和滤纸等浸泡在转印缓冲液中，利用电场作用使蛋白质从凝胶转移至膜上。此方法转印效果稳定、均匀，对不同分子量的蛋白质都能取得较好的转印效果，尤其适合高分子量蛋白质的转印。但其缺点是所需转印缓冲液量大，转印时间较长，通常需要 1 - 2 小时甚至更久，并且需要使用专门的转印槽设备 。

半湿式转印（Semi-wet Transfer）：半湿式转印结合了半干转印和湿转印的部分特点。它同样将凝胶和膜等置于滤纸之间，但滤纸需要预先浸泡在转印缓冲液中，转印过程中也会使用一定量的转印缓冲液。这种方法相对半干转印，电流分布更均匀，对高分子量蛋白质的转印效果有所提升，同时转印时间较湿转印短，所需缓冲液量也少于湿转印 。

真空转印（Vacuum Transfer）：真空转印是利用真空压力辅助蛋白质转印的技术。在转印过程中，通过真空泵产生负压，促使蛋白质从凝胶快速转移到膜上。该技术转印速度快，一般在几分钟内即可完成，而且转印效率高，能够有效减少蛋白质在转印过程中的损失。不过，真空转印设备成本相对较高，且对凝胶和膜的贴合度要求严格 。

快速转印（如 Trans-Blot Turbo 系统）：以 Trans-Blot Turbo 为代表的快速转印系统，采用创新的转印技术和优化的转印体系，极大缩短了转印时间。如 Trans-Blot Turbo 在标准模式下仅需 7 分钟，快速模式更可压缩至 3 分钟。其通过精准的电流控制和特殊设计，能够实现蛋白质的快速、高效、均匀转印，同时支持高通量处理，一次可处理多个凝胶和样品，适用于各种分子量范围的蛋白质转印，显著提升了实验效率 。

微接触印刷（Microcontact Printing）：这是一种非电泳转印技术，能将蛋白质单层量平衡在疏水弹性印章表面，在与底物接触 1 秒后，可实现超 99% 的高效转移，能够在微观尺度创建蛋白质功能图案，适用于多种蛋白质向亲水或疏水底物的转移，为蛋白质转印实验提供了新的思路和技术方向 。