BD 马铃薯葡萄糖琼脂（PDB）应储存在干燥、阴凉、避光的环境中。过高的湿度可能导致培养基吸潮，影响其物理状态和营养成分，增加微生物污染的风险；高温环境会加速培养基中成分的分解和变质，破坏其营养结构，降低培养基的质量。而光照可能会使培养基中的某些成分发生光化学反应，影响微生物的生长和培养效果 。因此，建议将其放置在专门的药品储存柜中，储存温度控制在 2 - 8℃为宜，避免与易挥发、有腐蚀性的化学试剂存放在一起，防止交叉污染。
在储存过程中，要定期检查 PDB 的包装是否完整。瓶装培养基需查看瓶盖是否拧紧，有无裂缝或破损；袋装培养基要检查包装是否密封，有无漏气、破损现象。若发现包装受损，应立即停止使用，因为包装破损会使培养基暴露在外界环境中，容易受到微生物污染和水分散失，无法保证培养效果，使用这样的培养基可能会导致实验结果不准确或微生物培养失败。
严格遵守 PDB 的保质期规定，在保质期内使用。不同规格和批次的培养基保质期可能有所差异，使用前务必仔细查看产品标签上的生产日期和保质期信息。临近保质期的培养基，其性能可能会有所下降，使用时需谨慎评估。对于超过保质期的培养基，无论外观是否有明显变化，都不应再使用，以免影响实验结果或微生物培养质量。
培养基的复温：从冰箱中取出 PDB 培养基后，不要立即打开包装进行使用，应先将其放置在室温环境下一段时间，使其温度回升至接近室温。这样做可以避免因温度骤变导致培养基出现冷凝水，影响微生物接种和生长，同时也有利于后续的溶解和分装操作。
实验器具准备：准备好无菌的培养皿、接种环、移液枪、枪头、酒精灯等实验器具。所有器具都需经过严格的灭菌处理，如培养皿可采用高压蒸汽灭菌法，在 121℃、103.4kPa 压力下灭菌 15 - 20 分钟；接种环和移液枪头可使用干热灭菌或湿热灭菌的方式进行灭菌，确保实验过程中不会引入杂菌，保证微生物培养的纯度和准确性。
溶解操作：根据实验需求，准确称量所需量的 PDB 培养基干粉，放入无菌的容器中，加入适量的蒸馏水或去离子水。按照产品说明书的要求，使用磁力搅拌器或玻璃棒不断搅拌，同时进行加热（可采用水浴加热或电炉加热，但需注意加热温度不宜过高，避免培养基成分被破坏），直至培养基溶解，形成均匀的液体。在加热溶解过程中，要防止培养基溢出或烧焦，若使用电炉加热，需有人全程值守，搅拌频率适中，确保培养基受热均匀。
分装与灭菌：将溶解后的培养基趁热分装到无菌的培养瓶或培养皿中。分装时要注意控制分装量，避免过多或过少影响微生物的生长空间和营养供给。分装完成后，立即对培养基进行高压蒸汽灭菌，一般在 121℃、103.4kPa 压力下灭菌 15 - 20 分钟，以杀灭培养基中可能存在的微生物和芽孢，保证培养基的无菌状态。灭菌结束后，让培养基在灭菌锅内自然冷却，待压力降至零后，打开锅盖取出培养基，放置在无菌环境中备用。
无菌操作：在接种微生物时，必须严格遵循无菌操作原则。在超净工作台或无菌室内进行操作，提前打开紫外灯对操作区域进行灭菌 30 分钟左右，关闭紫外灯后，打开风机，让空气流通一段时间，确保操作区域达到无菌状态。操作过程中，双手要用 75% 的酒精棉球擦拭消毒，接种环在使用前后都需在酒精灯火焰上灼烧灭菌，待冷却后再进行接种操作，避免高温杀死接种的微生物。
接种方法选择：根据不同的微生物种类和实验目的，选择合适的接种方法，如划线接种法、涂布接种法、倾注接种法等。划线接种法适用于分离纯化微生物，通过在培养基表面连续划线，使微生物逐渐稀释，形成单个菌落；涂布接种法常用于将菌液均匀分布在培养基表面，适合于菌落计数等实验；倾注接种法则是将菌液与冷却至适当温度的培养基混合后倒入培养皿中，适用于厌氧菌的培养等。
培养条件控制：接种后的培养基应放置在适宜的培养环境中进行培养。不同的微生物对培养温度、湿度和时间的要求各不相同，需根据微生物的特性进行调整。例如，真菌的培养温度一般在 25 - 30℃，培养时间通常为 2 - 7 天；细菌的培养温度和时间则因菌种而异，如大肠杆菌可在 37℃培养 18 - 24 小时。在培养过程中，要定期观察微生物的生长情况，记录菌落的形态、颜色、大小等特征，及时发现问题并进行处理，如出现污染现象，应立即停止培养并对相关器具和环境进行消毒处理。
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