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SDS-PAGE一步法凝胶快速制备试剂盒时,有哪些细节需要把控?

更新时间:2025-08-18      点击次数:53
使用 SDS-PAGE 一步法凝胶快速制备试剂盒时,还可从环境、设备清洁、试剂特性等角度把控细节,进一步保障实验质量:


  • 环境因素把控

    • 湿度控制:环境湿度对凝胶聚合有潜在影响,在高湿度环境下,凝胶表面易吸收水分,导致凝胶边缘出现模糊、不规则现象,影响电泳结果。建议在相对湿度 40%-60% 的环境中进行凝胶制备,若实验室湿度较高,可使用除湿设备调节。

    • 气流影响:制备凝胶时应避免在通风橱强气流下或风扇直吹的环境中操作,强气流会加速凝胶溶液表面水分蒸发,造成凝胶表面干裂,还可能使凝胶溶液产生波动引入气泡,影响凝胶均一性。

  • 设备深度清洁

    • 电泳槽定期维护:电泳槽使用后,需清洗残留的缓冲液和凝胶碎屑。长期不清理,残留物质会附着在电泳槽内壁,影响后续凝胶灌注的平滑度,甚至可能与凝胶发生反应,导致条带异常。清洗时可用温和的去污剂浸泡,再用大量蒸馏水冲洗干净,晾干备用。

    • 移液枪校准与清洁:定期对移液枪进行校准,确保量取试剂体积准确。同时,每次使用后及时清理移液枪枪头残留试剂,避免干涸堵塞,若移液枪不慎接触污染试剂,需拆卸进行深度清洁,防止交叉污染影响凝胶制备。

  • 试剂特性利用

    • 观察试剂颜色变化:部分试剂盒中的预混试剂可能含有显色剂,用于指示试剂是否变质或成分是否正常。使用前观察试剂颜色,若与标准颜色存在明显差异,如褪色、变色等,可能表明试剂失效,应谨慎使用。

    • 利用试剂密度差异:在灌注凝胶时,若凝胶溶液与电泳槽壁之间存在小气泡难以去除,可利用溶液密度差异。用微量移液器吸取少量密度稍大的甘油溶液,沿气泡边缘缓慢注入,甘油会将气泡挤出,且甘油对凝胶聚合和电泳过程无明显不良影响。



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