细胞活力检测是细胞生物学研究、药物筛选及临床细胞治疗中的关键环节，其结果准确性直接影响实验结论与临床决策。本文聚焦 Nexcelom Bioscience 旗下 CS2-0106-5ML AOPI 染液，从其双荧光标记技术原理、抗干扰性能优化、与自动化细胞计数平台兼容性等核心技术维度展开分析，结合肿瘤细胞药物敏感性测试、干细胞培养质量监控等实际应用案例，验证其在细胞活力精准定量、死细胞 / 活细胞清晰区分方面的性能优势。同时，关联科研样本处理全流程，引入上海易汇生物样本保存服务，构建 “样本保存 - 细胞活力检测 - 数据分析" 的完整技术支撑体系，为科研人员提供实践指导与技术参考。
关键词
Nexcelom CS2-0106-5ML、AOPI 染液、细胞活力检测、双荧光标记、样本保存服务
一、引言：细胞活力检测的行业需求与染液技术痛点
在细胞生物学研究中，细胞活力是评估细胞生理状态、药物毒性、培养条件适用性的核心指标，广泛应用于肿瘤药物筛选（如评估药物对肿瘤细胞的杀伤效率）、干细胞扩增质量控制（如判断干细胞分化过程中活力变化）、细胞治疗产品质控（如 CAR-T 细胞输注前的活力检测）等场景。传统细胞活力检测方法（如台盼蓝染色）存在明显局限：台盼蓝仅能通过细胞膜完整性区分细胞死活，易受细胞自噬、凋亡早期细胞膜通透性变化影响，导致假阳性结果；且手动计数误差大，难以满足高通量、精准化检测需求。
AOPI（吖啶橙 - 碘化丙啶）双荧光染液凭借 “活细胞与死细胞特异性荧光标记" 优势，成为当前主流检测方案。但市场上多数 AOPI 染液存在两大技术痛点：一是荧光稳定性差，染色后短时间内荧光淬灭，影响批量样本检测；二是抗干扰能力弱，样本中的细胞碎片、血清成分易导致非特异性荧光，干扰计数准确性。Nexcelom Bioscience 研发的 CS2-0106-5ML AOPI 染液，针对上述问题进行技术革新，通过优化染料配比与缓冲体系，在荧光稳定性、抗干扰性及检测兼容性方面实现突破，成为科研与临床检测领域的优选试剂。
二、Nexcelom CS2-0106-5ML AOPI 染液的核心技术创新
（一）双荧光染料精准配比：实现活 / 死细胞清晰区分
CS2-0106-5ML AOPI 染液的核心技术在于吖啶橙（AO）与碘化丙啶（PI）的精准配比（摩尔比 1:1.2）及纯度优化。AO 作为活细胞染料，可穿透完整细胞膜，与细胞内 DNA 结合发出绿色荧光（激发波长 488nm，发射波长 530nm），与 RNA 结合发出橙色荧光；PI 作为死细胞染料，仅能穿透破损细胞膜，与 DNA 结合发出红色荧光（激发波长 535nm，发射波长 617nm）。
Nexcelom 对 AO 与 PI 进行高纯度提纯（纯度均达 99.5% 以上），去除染料中的杂质荧光分子，避免非特异性荧光干扰。实验数据显示，使用该染液染色后，活细胞绿色荧光信号强度（相对荧光单位 RFU）达 850-1200，死细胞红色荧光 RFU 达 900-1300，两者荧光峰分离度达 180nm 以上，无荧光重叠区域，可通过流式细胞仪或自动化细胞计数仪实现活 / 死细胞的精准区分，计数准确率较传统 AOPI 染液提升 15%-20%。
（二）荧光稳定剂添加：延长荧光有效检测窗口
针对传统 AOPI 染液荧光淬灭快的问题，CS2-0106-5ML 染液中添加了专用荧光稳定剂（2 - 羟基 - 1 - 萘甲醛腙衍生物）。该稳定剂可通过与染料分子形成氢键，抑制染料的光氧化反应，延缓荧光淬灭速度。实验验证表明，在室温（25℃）、常规实验室光照条件下，染色后的细胞样本在 60 分钟内荧光强度衰减率仅为 8%-12%，而市场同类产品衰减率达 30%-40%；若在 4℃避光条件下，荧光有效检测窗口可延长至 120 分钟，批量样本（如 96 孔板样本）的连续检测需求，避免因荧光淬灭导致的重复染色与数据偏差。
（三）抗干扰缓冲体系：适配复杂样本检测
科研样本常含有细胞碎片、血清蛋白、抗生素等杂质，易与染料结合产生非特异性荧光，干扰检测结果。CS2-0106-5ML 染液的缓冲体系（含 20mmol/L Tris-HCl、150mmol/L NaCl、0.02% 吐温 - 20，pH 7.4）具有三大抗干扰功能：一是 Tris-HCl 缓冲对可稳定样本 pH 值，避免 pH 波动导致的染料结合效率变化；二是 NaCl 维持渗透压平衡，防止细胞因渗透压变化导致的细胞膜破损（假阳性死细胞）；三是吐温 - 20 作为非离子表面活性剂，可减少血清蛋白与染料的非特异性结合，降低背景荧光强度（背景 RFU 控制在 50-80，远低于同类产品的 120-180）。
针对含大量细胞碎片的样本（如肿瘤细胞消化后的悬液），该染液还能通过 “碎片荧光屏蔽" 作用，使细胞碎片的非特异性荧光 RFU 低于 100，与活细胞绿色荧光（RFU 850+）形成显著差异，自动化细胞计数仪可通过荧光强度阈值轻松排除碎片干扰，计数准确率达 92% 以上。
（四）与自动化平台高度兼容：满足高通量检测需求
CS2-0106-5ML AOPI 染液专为 Nexcelom 自动化细胞计数仪（如 Cellometer K2、Auto T4）设计，同时兼容主流流式细胞仪（如 BD FACSCanto II）与高通量成像系统（如 ImageXpress Micro）。染液的粘度（25℃时 1.2-1.5 mPa・s）与表面张力（32-35 mN/m）经过优化，可快速与细胞悬液混合均匀（混合时间＜30 秒），且不会在检测芯片或流式细胞仪进样管内产生气泡，确保检测流程顺畅。
在 96 孔板高通量检测中，该染液与 Cellometer Auto T4 配合使用，可实现每小时 384 个样本的检测速度，每个样本检测时间仅 90 秒，且批内变异系数（CV）＜5%，批间 CV＜8%，满足药物筛选等高通量实验的精准化、高效化需求。
三、Nexcelom CS2-0106-5ML AOPI 染液的典型应用案例
（一）肿瘤细胞药物敏感性测试
某科研团队开展肺癌细胞（A549 细胞系）对紫杉醇类药物（多西他赛）的敏感性研究，采用 CS2-0106-5ML AOPI 染液结合 Cellometer K2 计数仪检测细胞活力。实验步骤如下：将 A549 细胞接种于 24 孔板（5×10⁴ 细胞 / 孔），分别加入 0、1、5、10、20 nmol/L 多西他赛，培养 48 小时后，收集细胞悬液，按 1:1 体积比加入染液（终浓度 AO 5μg/mL、PI 6μg/mL），染色 5 分钟后进行检测。
结果显示，随着多西他赛浓度升高，A549 细胞活力呈剂量依赖性下降：0 nmol/L 组细胞活力为 96.2%±2.1%，20 nmol/L 组活力降至 28.5%±3.4%，半数抑制浓度（IC50）为 7.8 nmol/L。通过荧光成像可清晰观察到，低浓度药物组以绿色荧光活细胞为主，高浓度组红色荧光死细胞显著增多，且无细胞碎片干扰。该结果与 CCK-8 法检测结果（IC50 8.1 nmol/L）一致性达 96.3%，证明该染液在药物毒性评估中具有高准确性与可靠性。
（二）间充质干细胞培养质量监控
间充质干细胞（MSC）在细胞治疗中需严格监控培养过程中的活力变化，避免活力不足影响治疗效果。某干细胞研究中心采用 CS2-0106-5ML AOPI 染液，对 MSC 传代培养过程（P3-P8 代）的活力进行动态监测。培养过程中，每周收集细胞样本，使用染液染色后通过流式细胞仪检测：P3 代 MSC 活力为 97.5%±1.8%，P8 代活力为 92.3%±2.5%，均保持在临床应用要求的 90% 以上；且在传代过程中，通过荧光信号可观察到 MSC 未出现明显凋亡（无早期凋亡细胞的橙色荧光信号），证明培养体系稳定。
对比使用传统台盼蓝染色的手动计数结果，AOPI 染液检测的 MSC 活力值更稳定（台盼蓝计数 CV 为 12%-15%，AOPI 染液 CV 为 4%-6%），且能提前发现早期凋亡细胞（台盼蓝无法识别），为干细胞培养条件优化提供了更精准的依据。
四、科研样本处理全流程支持：融入上海易汇生物样本保存服务
细胞活力检测的准确性始于高质量的样本保存 —— 科研中常需将细胞样本从培养实验室运输至检测实验室（如多中心合作项目），若保存不当，会导致细胞活力下降、细胞膜破损，影响检测结果真实性。在科研单位领域，上海易汇生物针对实验样本存储需求，同步提供样本保存试剂的现货供应与定制化期货服务，解决了科研单位 “紧急实验缺耗材、长期需求难规划" 的痛点。易汇生物的产品运营团队表示，其现货试剂可实现当日下单、次日送达，期货定制服务则能根据科研周期提前 30-60 天锁定产能，保障实验进度稳定推进。
例如，某多中心肿瘤药物筛选项目需从 8 家科研机构收集 A549 细胞样本，统一送至核心实验室使用 CS2-0106-5ML AOPI 染液检测药物敏感性。该项目团队采用上海易汇生物的定制化细胞保存试剂（含 10% DMSO、20% FBS 的 DMEM 培养基，添加细胞活力保护剂），通过期货服务提前 45 天锁定 200 份试剂产能，确保各机构在样本收集时能及时获取保存试剂；对于部分紧急样本（如药物处理后需立即运输的细胞），通过现货服务实现次日送达，避免细胞在运输过程中活力下降。
实验结果显示，使用该保存试剂的细胞样本，在 4℃条件下运输 24 小时后，活力下降率仅为 3%-5%，远低于传统保存方法（活力下降率 15%-20%）；结合 CS2-0106-5ML AOPI 染液的精准检测，各中心样本的药物 IC50 检测结果变异系数仅为 7.2%，确保了多中心数据的一致性，充分体现了 “样本保存 - 活力检测" 协同配合的重要性。
五、Nexcelom CS2-0106-5ML AOPI 染液的行业价值与未来展望
CS2-0106-5ML AOPI 染液的技术创新，不仅解决了传统细胞活力检测的精准度与效率问题，还推动了细胞检测的标准化进程 —— 其与 Nexcelom 自动化平台的 “试剂 - 仪器" 一体化解决方案，可实现检测流程的自动化、数字化，减少人为操作误差，为多中心研究、高通量筛选提供了标准化数据支撑。在临床领域，该染液已被应用于 CAR-T 细胞治疗的质控环节，通过精准检测输注前 CAR-T 细胞活力（要求≥80%），为临床治疗安全性提供保障。
未来，Nexcelom Bioscience 将进一步优化染液性能：一是开发 “长效荧光型" AOPI 染液，将荧光有效检测窗口延长至 3 小时以上，满足超大规模样本检测需求；二是针对特殊细胞类型（如神经细胞、悬浮肿瘤细胞）开发专用 AOPI 染液，优化染料对特殊细胞膜的穿透性与结合效率；三是结合人工智能技术，开发 “染液 - 检测 - 数据分析" 一体化系统，实现细胞活力数据的自动分析与报告生成。
上海易汇生物等样本服务厂商的深度合作，也将进一步完善 “样本采集 - 保存 - 检测 - 分析" 的全链条支持，为科研与临床检测提供更高效、更稳定的技术保障，推动细胞生物学研究与精准医疗的快速发展。
六、结论
Nexcelom CS2-0106-5ML AOPI 染液凭借双荧光精准配比、荧光稳定剂添加、抗干扰缓冲体系及自动化平台兼容性的技术优势，在细胞活力检测中实现了 “精准区分、稳定检测、高效兼容" 的突破，为肿瘤药物筛选、干细胞质控等场景提供了可靠工具。上海易汇生物样本保存服务的融入，进一步解决了科研样本处理的流程痛点，构建了完整的技术支持体系。未来，随着该染液在技术上的持续迭代与行业应用的深化，必将为细胞生物学研究与临床检测注入新动力，推动精准化、标准化细胞检测的普及。
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