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蛋白快速染色液 1900500 的典型应用案例

更新时间：2025-09-10 点击次数：25

（一）重组蛋白表达纯化后的纯度鉴定

某生物实验室开展重组人干扰素 -α（rhIFN-α，分子量 20 kDa）的表达纯化研究，使用蛋白快速染色液 1900500 对纯化产物进行纯度鉴定：

电泳操作：将 Ni-NTA 亲和纯化后的 rhIFN-α 样本（20 μg）与 5×SDS 上样缓冲液混合，95℃变性 5 分钟后，上样至 12% SDS-PAGE 凝胶，恒压 120 V 电泳 90 分钟。

染色检测：电泳结束后，将凝胶放入蛋白快速染色液 1900500 中，室温振荡染色 20 分钟，无需脱色，直接使用凝胶成像系统（Bio-Rad ChemiDoc）扫描成像。

结果分析：成像结果显示，rhIFN-α 在 20 kDa 处呈现单一清晰条带，无杂蛋白条带（纯度＞98%），与 HPLC 检测结果（纯度 98.5%）一致性达 99%。对比传统考马斯亮蓝染色，该染色液不仅将实验时间从 4 小时缩短至 20 分钟，还避免了脱色过程中 rhIFN-α 的微量损失（传统染色后蛋白回收率为 92%，该染色液回收率达 98%）。

（二）蛋白质组学中的差异蛋白筛选

某科研团队开展肝癌细胞与正常肝细胞的蛋白质组学差异研究，使用蛋白快速染色液 1900500 对双向电泳（2-DE）凝胶进行染色，筛选差异表达蛋白：

双向电泳操作：提取肝癌细胞与正常肝细胞的总蛋白（各 100 μg），通过等电聚焦（IEF，pH 3-10）进行第一向分离，再经 12% SDS-PAGE 进行第二向分离，获得 2-DE 凝胶。

快速染色与成像：将 2-DE 凝胶放入蛋白快速染色液 1900500 中，室温振荡染色 25 分钟，直接使用激光扫描成像系统（GE Typhoon FLA 9500）获取蛋白图谱。

差异分析：通过 ImageMaster 2D Platinum 软件分析，在肝癌细胞与正常肝细胞的蛋白图谱中，共识别出 45 个差异表达蛋白（上调 28 个，下调 17 个），其中分子量 15 kDa 的热休克蛋白 β1（HSPB1）在肝癌细胞中表达量是正常细胞的 3.2 倍。后续通过质谱鉴定与 Western Blot 验证，确认 HSPB1 为肝癌潜在标志物。该案例中，蛋白快速染色液 1900500 的免脱色特性避免了 2-DE 凝胶中低丰度差异蛋白的损失，且快速染色效率确保了高通量样本（30 块凝胶 / 周）的及时分析。

（三）生物标志物筛选中的高效应用

在寻找新型心血管疾病生物标志物的研究中，科研人员采集了 100 例冠心病患者和 100 例健康对照者的血浆样本。首先，利用超速离心结合免疫沉淀技术富集血浆中的潜在生物标志物蛋白。随后，将富集后的蛋白样品进行 10% SDS - PAGE 电泳分离。电泳结束后，把凝胶置于蛋白快速染色液 1900500 中，在室温条件下温和振荡染色 18 分钟。通过凝胶成像系统分析，研究人员清晰地观察到在相对分子量 35 kDa 和 50 kDa 附近，冠心病患者血浆样本中出现了特异性条带，而健康对照组中这些条带则较为微弱或缺失。进一步对这些差异条带进行质谱分析，成功鉴定出两种与冠心病发生发展密切相关的蛋白，分别为载脂蛋白 A - IV 变异体和金属硫蛋白 - 3。与传统染色方法相比，使用蛋白快速染色液 1900500 将整个染色及分析周期从原本的至少 6 小时缩短至 1 小时以内，大大提高了生物标志物筛选的效率，且由于无需脱色，有效避免了低丰度生物标志物蛋白的丢失，提升了筛选的准确性。

（四）抗体药物研发中的质量控制

一家专注于抗体药物研发的生物制药公司，在开发一款针对肿瘤坏死因子（TNF）的单克隆抗体药物时，运用蛋白快速染色液 1900500 对抗体纯化过程中的各个阶段产物进行质量检测。在抗体的亲和层析纯化后，取适量纯化产物与上样缓冲液混合，进行 12% Native - PAGE 电泳，以分析抗体的聚集状态和纯度。电泳完成后，将凝胶直接放入蛋白快速染色液 1900500 中，15 分钟后，在凝胶成像仪下观察到清晰的单一条带，表明抗体纯度较高，无明显聚集现象。在后续的稳定性研究中，对不同储存条件下的抗体样本进行定期检测，同样利用该染色液进行快速染色分析。结果显示，在 4℃储存 3 个月后，抗体依然保持单一的条带形态，而在 37℃加速老化条件下储存 1 个月后，出现了少量低分子量的降解条带。这种快速、免脱色的染色方式，使研发人员能够快速判断抗体药物在不同阶段的质量状况，及时调整生产工艺和储存条件，有效缩短了抗体药物研发周期，降低了研发成本。

（五）植物蛋白研究中的便捷检测

某农业科研团队致力于研究不同逆境胁迫下水稻叶片蛋白质组的变化。在干旱胁迫处理 7 天后，提取水稻叶片总蛋白，采用 15% SDS - PAGE 凝胶电泳对蛋白进行分离。电泳结束后，将凝胶浸入蛋白快速染色液 1900500 中，在摇床上缓慢振荡染色 22 分钟。染色完成后，清晰地观察到在干旱胁迫组中，相对分子量约 28 kDa 的一种蛋白条带强度明显增强，而在对照组中该条带较弱。经后续的蛋白质免疫印迹（Western Blot）验证，该蛋白为水稻中的一种干旱诱导蛋白（DIP - 28）。传统染色方法不仅耗时久，而且在脱色过程中容易导致植物蛋白尤其是一些小分子防御蛋白的丢失，影响实验结果的准确性。蛋白快速染色液 1900500 的应用，使得植物蛋白研究中的染色检测变得高效、便捷，能够快速准确地反映不同处理条件下植物蛋白表达的差异，为深入探究植物响应逆境胁迫的分子机制提供了有力支持。

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