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Eppendorf 移液器使用技巧与注意事项

更新时间:2025-10-20      点击次数:21
Eppendorf 移液器使用技巧与注意事项
Eppendorf 移液器(如 Research® plus 系列)凭借高精度、人体工学设计等优势,成为科研实验的核心工具。但实际操作中,不规范的使用方法易导致精度下降、设备损耗,甚至影响实验结果。本文结合 Eppendorf 移液器的技术特性,从精准移液技巧、日常维护保养、安全操作注意事项三个维度,提供可落地的操作指南,帮助科研人员发挥设备性能,延长使用寿命。
一、精准移液技巧:发挥 Eppendorf 移液器的精度优势
Eppendorf 移液器的精度(系统误<±0.5%,随机误<0.3%)需通过规范操作实现,不同移液场景(微量、大量、腐蚀性试剂)需适配不同技巧:
(一)微量样品移液技巧(≤10 μL)
微量移液(如 qPCR 实验中 0.5-2 μL cDNA 模板移取)对操作精度要求,需注意以下细节:
  1. 枪头选择与适配:优先使用 Eppendorf 原装低吸附枪头(如货号 0030073124,10 μL 规格),其内壁经特殊硅化处理,液体残留量<0.1 μL,避免微量样品损失,需将移液器枪头锥部对准枪头管口,轻轻旋转按压,确保密封(可听到 “咔嗒" 声),避免因密封不严导致的体积偏差(偏差可达 2%-3%)。

  1. 吸液与排液速度控制:采用 “慢吸慢排" 原则 —— 吸液时,将按钮缓慢按至第一停点(量程设定点),等待 1-2 秒(尤其黏稠样品,如甘油溶液),确保液体吸入枪头;排液时,先将枪头贴壁(与容器壁呈 10°-15° 角),缓慢按至第一停点,停留 1 秒后继续按至第二停点,排出残留液体,避免微量样品残留(如 0.1 μL 残留对 1 μL 移液的误差影响达 10%)。

  1. 量程调节技巧:调节量程时,需遵循 “从大到小" 原则(如从 10 μL 调至 2 μL,直接逆时针旋转旋钮至 2 μL;若需从 2 μL 调至 10 μL,需先调至 15 μL 再回调至 10 μL),避免旋钮过度旋转导致内部齿轮磨损,影响精度。同时,禁止将量程调至超过移液器的最大量程(如 10 μL 移液器调至 11 μL),否则会损坏活塞密封件。

(二)大量样品移液技巧(≥100 μL)
大量移液(如细胞培养中 100-1000 μL 培养基分装)需平衡精度与效率,关键技巧如下:
  1. 重心控制与姿势:利用 Eppendorf 移液器的人体工学手柄设计(重心与手指握持点重合),握持时手掌自然贴合手柄,手腕保持水平,避免弯腰或耸肩操作(长期可导致手腕劳损)。移液时,以肘部为支点,带动手臂移动,而非仅靠手指发力,减少操作疲劳的同时,确保移液路径稳定,体积偏差<0.5%。

  1. 多通道移液器的一致性控制:使用 Eppendorf 8 通道 / 12 通道移液器(如 Research® plus 8 通道,50-300 μL)时,需确保所有枪头同时安装到位(可将移液器垂直扣在枪头盒上,一次性按压安装),避免因个别枪头密封不严导致的通道间偏差(偏差>1%)。移液后,可通过观察各孔液体高度是否一致,验证通道一致性,若发现偏差,及时更换枪头重新操作。

(三)特殊样品移液技巧(黏稠、挥发性、腐蚀性试剂)
针对特殊样品,需结合 Eppendorf 移液器的抗腐蚀、防污染设计,调整操作方法:
  1. 黏稠样品(如甘油、蛋白溶液):吸液时,将按钮按至第二停点(而非第一停点),缓慢吸入样品,停留 3-5 秒(让样品充分流入枪头),排液时同样缓慢按至第二停点,避免因样品黏稠导致的体积不足(传统操作易导致 10%-15% 的体积偏差)。同时,选择大口枪头(如 Eppendorf 1000 μL 大口枪头),减少样品流动阻力。

  1. 挥发性样品(如乙醇、丙酮):此类样品易挥发导致枪头内压力变化,需快速完成吸液与排液操作(总时间<5 秒),且排液时确保枪头接触液面(避免样品挥发后体积减少)。若需多次移取,建议每移取 3-5 次后,重新校准移液器(使用 Eppendorf 校准工具),确保精度。

  1. 腐蚀性试剂(如强酸、强碱):使用 Eppendorf 抗腐蚀移液器(如 Research® plus Corrosion-Resistant 系列),其枪头锥部采用 1.4404 特种不锈钢材质,可耐受 98% 硫酸、37% 盐酸。操作时需佩戴手套,避免试剂接触移液器主体(若不慎接触,立即用 70% 乙醇擦拭),且移液后及时更换枪头,避免试剂残留腐蚀枪头锥部。

二、日常维护保养:延长 Eppendorf 移液器使用寿命
Eppendorf 移液器的设计使用寿命可达 5 年以上,但需通过规范的日常维护实现,核心维护要点包括:
(一)清洁保养:避免污染与腐蚀
  1. 外部清洁:每日实验结束后,用 70% 乙醇擦拭移液器主体(尤其是手柄、按钮、枪头锥部),去除样品残留(如蛋白、核酸),避免残留样品干燥后堵塞枪头锥部或腐蚀材质。若接触过放射性或有毒样品,需使用专用消毒剂(如含氯消毒剂)擦拭,再用超纯水清洁,最后用 70% 乙醇消毒。

  1. 内部清洁与灭菌:若移液器内部被样品污染(如样品倒吸进入移液器),需拆解移液器(参照 Eppendorf 拆解指南),用超纯水冲洗内部活塞、弹簧等部件,晾干后重新组装。对于需要无菌操作的场景(如细胞培养),可将移液器枪头锥部拆下,进行 121℃高压灭菌(20 分钟),灭菌后晾干再安装使用(Eppendorf Research® plus 系列的枪头锥部支持高压灭菌,其他部件禁止灭菌)。

(二)精度校准:定期验证与调整
Eppendorf 移液器的精度会随使用次数增加(如 1 万次以上)逐渐衰减,需定期校准:
  1. 校准周期:普通实验场景(如常规移液)每 6 个月校准 1 次;高频使用(如每日移液 100 次以上)或接触腐蚀性试剂的场景,每 3 个月校准 1 次。校准需使用 Eppendorf 原装校准工具(如货号 0030108556 校准套装),或委托 Eppendorf 服务团队进行专业校准(符合 ISO 8655 标准)。

  1. 简易校准方法(实验室自查):使用分析天平(精度 0.01 mg)、超纯水(25℃,密度 1 g/mL)进行自查 —— 设定移液器量程(如 100 μL),移取超纯水至称量皿中,记录重量,重复 5 次,计算平均值与理论值(100 mg)的偏差,若偏差>±1%,需进行专业校准。

(三)耗材适配:选择 Eppendorf 原装耗材
  1. 枪头适配:优先使用 Eppendorf 原装枪头,其与移液器枪头锥部的配合间隙<0.001 mm,确保密封精度,避免因非原装枪头的尺寸偏差导致的体积误差(偏差可达 3%-5%)。上海易汇生物提供 Eppendorf 原装枪头的现货供应,当日下单次日送达,可避免因枪头短缺导致的实验中断。

  1. 滤芯更换:对于配备疏水滤芯的移液器(如 Research® plus 带滤芯系列),当移取易污染样品(如病毒、细菌)后,需及时更换滤芯(Eppendorf 原装滤芯货号 0030073185),避免样品进入移液器内部造成交叉污染。建议每移取 50 次污染样品更换 1 次滤芯,常规样品每 3 个月更换 1 次。

三、安全操作注意事项:避免设备损坏与实验风险
不规范的操作不仅影响精度,还可能导致移液器损坏或实验安全风险,需重点关注以下事项:
(一)禁止违规操作:避免设备损坏
  1. 禁止超量程使用:严格按照移液器的量程范围操作(如 10 μL 移液器禁止移取 11 μL 样品),超量程会导致内部活塞过度拉伸或压缩,损坏密封件,影响精度(修复成本可达设备价格的 30%)。

  1. 禁止枪头未安装时按压按钮,按压按钮会导致活塞直接暴露,若有灰尘或杂质进入,会磨损活塞表面,导致密封不良(表现为移液体积偏差突然增大)。

  1. 禁止移液器倒置或倾斜存放:移液后若枪头内残留液体,倒置或倾斜存放会导致液体流入移液器内部,腐蚀电路(电动移液器)或弹簧(手动移液器),建议使用 Eppendorf 移液器支架(如货号 0030122470)垂直存放。

(二)实验安全注意事项:避免样品污染与人员伤害
  1. 交叉污染防控:移取不同样品时,必须更换枪头,禁止重复使用枪头(即使移取同一种样品,也需避免枪头接触容器壁后交叉污染)。对于高风险样品(如病原微生物、有毒试剂),需在生物安全柜内操作,且移液器使用后需进行表面消毒(70% 乙醇擦拭)。

  1. 人员防护:移取腐蚀性、挥发性试剂时,需佩戴手套、护目镜,避免试剂接触皮肤或吸入挥发气体。若试剂不慎接触皮肤,立即用大量清水冲洗,必要时就医。

  1. 耗材储存与管理:Eppendorf 枪头、滤芯等耗材需存放在干燥、洁净的环境中(温度 15-25℃,相对湿度 30%-60%),避免高温高湿导致耗材变质(如枪头内壁硅化层脱落)。上海易汇生物的期货定制服务可根据科研周期提前 30-60 天锁定耗材产能,确保耗材储存条件稳定,避免因耗材变质影响实验。

四、常见问题排查:快速解决使用中的突发问题
实验中若遇到移液精度下降、操作卡顿等问题,可按以下步骤排查:
  1. 移液体积偏差增大

  • 检查枪头是否安装到位(重新安装并确认密封);

  • 检查枪头是否过期或变质(如低吸附枪头硅化层脱落,可更换新枪头测试);

  • 检查移液器是否需要校准(按前文简易校准方法自查)。

  1. 按钮按压卡顿

  • 检查按钮是否有样品残留(用 70% 乙醇擦拭按钮与手柄连接处);

  • 检查内部弹簧是否生锈(若有,需联系 Eppendorf 维修,禁止自行拆解)。

  1. 枪头无法安装或拆卸

  • 检查枪头锥部是否有异物(如枪头碎片,用镊子小心取出);

  • 检查枪头锥部是否变形(若变形,需更换枪头锥部,建议由专业人员操作)。

五、总结:构建 “规范操作 - 定期维护 - 合规耗材" 的使用体系
Eppendorf 移液器的性能发挥与使用寿命,依赖于 “规范操作技巧 + 定期维护保养 + 合规耗材适配" 的综合管理:通过精准移液技巧精度优势,通过日常维护延长设备寿命,通过安全操作避免风险。同时,上海易汇生物提供的 Eppendorf 原装耗材现货与期货服务,可确保耗材供应稳定,避免因耗材不当导致的设备损耗或实验误差。
遵循以上技巧与注意事项,不仅能让 Eppendorf 移液器始终保持最佳性能,为实验结果的可靠性提供保障,还能降低设备维修成本,提升科研实验的效率与安全性。



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