LIPIDTOX™ 荧光染料在代谢性疾病研究中的脂滴动态定量分析应用

LIPIDTOX™ 荧光染料在代谢性疾病研究中的脂滴动态定量分析应用

内容简介： 本文系统评述了ENZO LIPIDTOX™ 系列中性脂荧光探针在细胞脂代谢研究中的关键技术优势。文章从脂滴（Lipid Droplet）的细胞生物学功能出发，详解了LIPIDTOX™ 染料相较于传统油红O染色、BODIPY™ 493/503染料的更高特异性、更优信噪比及与多色荧光标记的兼容性。重点探讨了如何利用该工具结合高内涵成像系统（HCS）定量分析肝细胞、脂肪细胞、巨噬细胞等在代谢应激下的脂滴数量、大小、体积变化，及其在NAFLD、动脉粥样硬化、肥胖等研究中的应用方案。

关键词： 脂滴、LIPIDTOX™、荧光成像、高内涵筛选（HCS）、代谢疾病

正文：

（正文约2100字，详细阐述以下要点：

1. 脂滴生物学重要性： 从惰性的能量储存细胞器到活跃的代谢枢纽，参与脂质代谢、膜合成、信号传导。

2. 现有染色方法对比：

• 油红O： 半定量，仅限于固定细胞，不易进行多标记。

• BODIPY™： 可能染色其他脂质结构，存在光谱交叉。

• LIPIDTOX™ 优势： 专一性结合中性脂（甘油三酯、胆固醇酯），多种颜色（如绿色、红色、深红色），适用于活细胞/固定细胞染色，与抗体标记（如线粒体、内质网标志物）、DAPI等共染。

3. 实验方案与定量分析：

• 染色条件优化（浓度、时间、洗涤）。

• 使用高内涵成像分析系统，自动识别细胞，定量每个细胞的脂滴参数：数量、平均直径、总脂滴面积、 integrated intensity。

• 统计学分析比较不同处理组（如脂肪酸处理vs对照，药物处理vs模型组）。

4. 应用实例：

• 非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）模型： 在肝细胞系（HepG2）或原代肝细胞中诱导steatosis，并用潜在药物干预，定量脂滴积聚情况。

• 巨噬细胞泡沫化： 用氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）处理巨噬细胞，模拟动脉粥样硬化斑块形成，研究清道夫受体功能及抗泡沫化药物。

• 脂肪细胞分化： 追踪3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂滴的形成与融合动态。

5. 结合其他检测： 与 Seahorse 能量代谢分析、甘油及游离脂肪酸测定等生化方法联用，多维度揭示细胞代谢状态。