细胞电转染技术突破难转染细胞基因递送瓶颈

细胞电转染技术突破难转染细胞基因递送瓶颈

内容简介：
本文重点介绍Bio-Rad Gene Pulser Xcell电转染系统在难转染细胞中的应用突破。系统分析方波脉冲、指数衰减波等不同波形参数对转染效率的影响，探讨其在原代细胞、干细胞和悬浮细胞转染中的优化策略。

正文：
电转染技术通过瞬时电脉冲在细胞膜上形成可逆孔隙，实现基因物质的高效递送。Bio-Rad Gene Pulser Xcell系统提供方波和指数衰减波两种脉冲模式，可精确控制电压、脉冲时长和脉冲次数等参数。

在技术参数优化方面，研究发现：对于悬浮细胞（如Jurkat），采用指数衰减波（250V，950μF）可获得>80%转染效率；对于贴壁细胞（如原代神经元），方波脉冲（100V，30ms）效果更佳；对于难转染的干细胞，采用多脉冲方波（5×20ms，100V）可显著提高转染效率同时保持细胞活力。

系统配备的PC控制软件包含超过100种细胞类型的预设程序，并可记录用户自定义方案。阻抗检测功能可实时监测电转过程，自动调整脉冲参数。实验数据显示，相比脂质体转染，电转染的效率提高3-5倍，特别是在原代T细胞转染中，效率从20%提升至90%以上。

在CAR-T细胞治疗研究中，采用优化后的电转染方案，CAR基因转染效率达95%，细胞存活率>85%，临床级细胞治疗产品生产要求。

关键词： 电转染、难转染细胞、脉冲优化、原代细胞、基因递送