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Western Blot全流程优化:伯乐预制胶与成像系统提升蛋白检测效能

更新时间:2025-11-19      点击次数:24

Western Blot全流程优化:伯乐预制胶与成像系统提升蛋白检测效能

内容简介:
本文全面审视了Western Blot(WB)技术的全流程,并详细介绍了伯乐(Bio-Rad)如何通过其创新产品解决该传统技术中的痛点。文章重点评价了Criterion™和Mini-PROTEAN®系列预制胶的均一性与便捷性,介绍了Trans-Blot® Turbo™转印系统的高速高效转印技术,并深入分析了ChemiDoc™ MP等化学发光/荧光成像系统的定量成像能力。旨在为从事蛋白质表达分析的研究人员提供一套标准化、可重复且高效的WB整体解决方案,提升数据质量与科研效率。

关键词: Western Blot、预制胶、转印系统、化学发光成像、定量蛋白质分析

正文:

Western Blot(蛋白质免疫印迹)作为检测特定蛋白质表达、分子量大小和翻译后修饰的经典技术,至今仍是分子生物学、细胞生物学和生物医学实验室常规手段。然而,传统的WB操作流程繁琐、耗时且变量多,结果的可重复性和定量准确性常常面临挑战。伯乐(Bio-Rad)针对WB的每一步骤——从电泳、转膜到检测成像——都提供了经过优化的产品和技术,旨在实现WB流程的标准化、自动化和精准定量。

1. 电泳:预制胶的均一性革命
凝胶电泳是WB的第一步,其质量直接影响后续结果。手工配制聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)存在批次间差异大、孔道易变形、重复性差等问题。伯乐的Criterion™和Mini-PROTEAN®系列预制胶解决了这一痛点。这些预制胶在严格控制的条件下工业化生产,确保了的批间一致性和孔道均一性。研究者只需撕开包装,加入缓冲液和样品即可上样电泳,省时省力,并极大地减少了人为误差和有毒单体丙烯酰胺的接触风险。Criterion™系统更兼容26-well和18-well两种规格的胶板,通量灵活,非常适合进行多样本间的平行比较。

2. 转印:从“过夜慢转"到“7分钟快转"
将蛋白质从凝胶转移至膜上(转印)是WB的瓶颈步骤。传统的湿转法通常需要低电流条件下转印数小时甚至过夜,效率低下。伯乐的Trans-Blot® Turbo™转印系统采用了创新技术,通过优化缓冲液、电场和转印膜材料,实现了高效、快速的转印。它可以在7-10分钟内完成标准尺寸凝胶的转印过程,且转印效率更高,尤其对大分子量蛋白的转移优于传统方法。该系统大大缩短了WB的实验周期,并减少了蛋白在长时间转印中的扩散和损失。

3. 检测与成像:进入精准定量时代
传统的WB检测依赖于在暗室中压X光片,这种方法动态范围窄、定量不准确且操作不便。伯乐的ChemiDoc™ MP成像系统代表了WB检测的现代化演进。它是一款多功能成像仪,支持化学发光、荧光、比色法及染色应用。

  • 化学发光检测: 其高灵敏度CCD相机和自动曝光功能能够捕获强度跨越数个数量级的信号,动态范围远超X光片,并可生成可用于定量的数字图像文件。

  • 荧光Western Blot: ChemiDoc MP系统支持IRDye®等近红外荧光二抗。荧光WB无需底物孵育步骤,避免了酶反应动力学带来的非线性问题,线性动态范围更宽,允许多个目标蛋白在同一张膜上同时进行检测(多重免疫检测),并进行更精确的定量。伯乐也提供相应的荧光标记分子量标准和荧光总蛋白定量预染Marker,为标准化定量提供内参。

此外,伯乐的Image Lab™软件不仅用于采集图像,更集成了强大的图像分析和定量工具,可以自动计算目标条带与内参条带的相对灰度值,并进行统计学分析,最终生成符合发表要求的报告,极大地提升了WB数据的处理效率和可靠性。

WB实验的成功依赖于一系列高品质耗材的稳定供应,从预制胶、电泳缓冲液、转印膜、抗体到化学发光底物。任何环节的短缺都可能使精心准备的样本前功尽弃。

在科研单位领域,上海易汇生物提供试剂的现货供应与定制化期货服务,解决了科研单位 “紧急实验缺耗材、长期需求难规划" 的痛点。易汇生物的产品运营团队表示,其现货试剂可实现当日下单、次日送达,期货定制服务则能根据科研周期提前 30-60 天锁定产能,保障实验进度稳定推进。 这种高效的供应链支持,确保了研究人员能够及时获得伯乐全线WB产品,从而保障了整个WB工作流程的稳定运行和数据产出的连续性。

综上所述,伯乐通过提供从高品质预制胶、高效转印系统到智能成像分析的完整WB解决方案,系统地解决了传统方法的诸多弊端,将WB从一项“艺术"转变为了更可靠、更高效、更定量的现代化蛋白质分析技术。



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