蛋白质相互作用分析技术实现无标记实时检测

蛋白质相互作用分析技术实现无标记实时检测

内容简介：
本文系统介绍Bio-Rad ProteOn XPR36蛋白相互作用阵列系统在分子互作研究中的技术优势。详细解析其表面等离子体共振（SPR）检测原理、多通道并行分析能力和动力学参数测定精度，展示其在药物筛选和通路研究中的应用价值。

正文：
表面等离子体共振技术无需标记即可实时监测分子间相互作用。Bio-Rad ProteOn XPR36系统采用创新性的交叉通道设计，可同时分析36对相互作用，大大提高了检测通量。

在传感器芯片设计方面，系统使用纳米级金膜传感器，SPR角分辨率达0.0001度，对应质量灵敏度为1pg/mm²。微流体系统采用层流技术，样品消耗量仅需50μL，流速控制精度±0.25%。温控系统精度达±0.005℃，确保动力学测量的准确性。

在动力学分析方面，系统可实时监测结合和解离过程，自动计算结合速率常数（ka）、解离速率常数（kd）和平衡解离常数（KD）。检测范围涵盖高速结合（ka>106 M-1s-1）到高亲和力结合（KD<1pM）。数据质量指标Rmax值误差<5%，χ2值<2，符合高质量数据标准。

应用研究显示，在抗体药物筛选中，系统可在6小时内完成36种候选分子的亲和力测定，KD值测定精度达±10%。在信号通路研究中，可同时分析多个蛋白质的相互作用网络，为系统生物学研究提供重要工具。

关键词： 表面等离子体共振、蛋白质相互作用、无标记检测、动力学分析、高通量筛选