Illumina测序试剂盒TruSight Oncology 500（TSO500）

检测基因范围：靶向 523 个基因，可评估所有 DNA 和 RNA 变异类型，包括单核苷酸变异（SNV）、拷贝数变异（CNV）、插入缺失（Indel）、融合，同时涵盖微卫星不稳定性（MSI）和肿瘤突变负荷（TMB）的检测，能全面解析肿瘤相关基因信息。

样本类型与用量：适用于 FFPE 组织样本，DNA 用量为 40 ng，RNA 用量为 40 - 80 ng，对珍贵的肿瘤样本具有较好的兼容性。

测序深度与灵敏度：通过 “超覆盖度探针" 设计，确保低频突变区域测序深度达 1000× 以上。针对 0.5% 等位基因频率的 KRAS G12D 突变，检出率高达 98% ，且假阳性率＜0.1%；对肿瘤组织样本中 0.1% 的低频突变，当测序深度达 5000× 时，检出率仍保持 90% 以上，能精准捕获肿瘤异质性中的低频突变信息。

测序平台兼容性：可在 NovaSeq X 系列、NextSeq 1000 系统、NextSeq 2000 系统等多种 Illumina 主流测序平台上使用，支持灵活的实验规模选择。在 NextSeq 1000 和 NextSeq 2000 系统上，每次运行可处理 8 - 36 个样本；在 NovaSeq 6000 系统上，可处理 16 - 192 个样本；在 NovaSeq X 系列上，可处理 32 - 960 个样本 。

数据产出时间：从样本到结果仅需 4 - 5 天，通过手动或自动化工作流程，结合即用型 Dragen 二次分析流程，可快速获取检测结果 。

配套分析软件：配套 Illumina Local Run Manager 软件搭载 “肿瘤专用碱基识别模型"，对 InDel 类型突变的识别准确率较传统算法提升 30%，可有效区分真实突变与测序误差。

文库制备方法：采用机械 DNA 片段化和接头连接的方式，无需 PCR 扩增，避免了 PCR 扩增引入的偏差和错误，能更真实地反映基因组信息。

样本类型与用量：适用于全基因组测序，推荐样本为 DNA，用量为 1 μg 。

测序覆盖度与质量：在测序挑战性区域（如 GC 富集区、启动子和重复区域）具有覆盖能力，能提供高质量的基因组覆盖，减少文库偏差和缺口，数据质量高，可实现全基因组的变异检测，为深入的基因组分析提供可靠数据 。

实验时间：总检测时间为 5 小时，其中手动操作时间为 4 小时，实验流程相对简洁高效。

通量选择：有多种通量选择，带单索引的试剂盒支持 24 个样本的手动低通量研究；带 96 个 CD 索引的试剂盒支持 96 个样本的高通量研究，且可在液体处理机器人上实现自动化操作（也可手动处理）；IDT for Illumina 双（UD）索引（24 或 96）可提高样本复用率，实现 reads 的准确分配和流动池的高效利用 。

适用测序平台：支持所有 Illumina 测序仪器，可根据实验需求灵活选择合适的测序平台，满足不同规模的研究需求。

测序平台特性：专为 NextSeq 550 系统设计，该系统具备高灵活性和广泛的应用范围，可开展从 mRNA - seq 到外显子组测序等多种应用 。

试剂性能提升：v2.5 版本的试剂采用了优化的流动池，能维持起始荧光强度，在整个运行过程中性能更稳定，可承受更高的湿度、温度以及更长时间的储存，同时延续了 v2 试剂和缓冲液墨盒的高精度特性 。

测序数据产出：高输出试剂盒的输出量可达 120 GB（300 - cycle 高输出试剂盒）、60 GB（150 - cycle 高输出试剂盒）；中输出试剂盒的输出量可达 39 GB（300 - cycle 中输出试剂盒）、19.5 GB（150 - cycle 中输出试剂盒） 。高输出试剂盒每运行一次最多可产生 400 M 个簇，中输出试剂盒最多可产生 130M 个簇，能满足不同深度的测序需求 。

样本兼容性：兼容 DNA 和 RNA 样本，可进行双端测序、测序控制、簇生成以及基于合成的测序，还配备了 PhiX v3 作为测序对照，确保测序过程的准确性和可靠性 。

数据稳定性：试剂盒采用射频识别（RFID）编码耗材，可确保试剂的可追溯性和兼容性，有效提高实验数据的稳定性和可重复性。

检测对象与样本类型：用于对血浆中的循环肿瘤 DNA（ctDNA）进行全面基因组分析，样本仅需 4 ml 血浆，从中提取 20 ng 的 cfDNA ，实现了对肿瘤的微创检测。

检测灵敏度与特异性：基于 UMI 的杂交捕获文库制备和深度测序技术，对单核苷酸变异（SNV）的检测灵敏度可达 0.2% VAF，分析灵敏度≥95%（小变异，≥0.5% VAF），分析特异性≥99.995%（小变异，≥0.5% VAF） ，能精准检测血浆中微量的肿瘤相关基因突变。

检测基因范围与内容：靶向 523 个基因，可评估主要变异类型的 DNA 变异（如 SNV、MNV、Indel、CNV 和基因重排），同时涵盖关键的免疫肿瘤基因特征（TMB、MSI），为肿瘤的精准诊断和免疫治疗方案的制定提供全面依据 。

实验流程与时间：从纯化核酸到变异报告仅需 3 - 4 天，文库制备可在一天内完成，采用化学技术和便于自动化的试剂盒及方法，大大缩短了检测周期。配合 Dragen 二次分析，可在本地或云端快速进行变异调用 。

测序平台兼容性：与 NovaSeq 6000（NovaSeq 6000Dx 研究模式）和 NovaSeq X 系列兼容，提供灵活的测序选择。在 NovaSeq X 系列上，运行时间缩短近 40%，批次规模更灵活（4 - 48 个样本） 。