高电压电泳仪在操作时要引起注意的一些事项
更新时间:2020-09-03 点击次数:2071
高电压电泳仪在操作时要引起注意的一些事项
高电压电泳仪是实现电泳分析的仪器,一般由电源、电泳槽、检测单元等组成。它装有定时器,恒压或恒流输出,以及一个全新的暂停/继续功能,能使您在运行时改变已编程的参数而无须重新设定时间。它的光滑表面,橡胶按键以及绿色透明机箱的设计,与其操作简便的特点一样。
电泳技术是分子生物学研究*的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有重要的意义。高电压电泳仪正是基于上述原理设计制造的。
它对进样技术要求很高,进样操作事项如下:
1、进样区带越小越好:无论采用何种进样方式,插入样品溶液的深度一般要少于总长度的1%~2%,以尽量减少样品溶液经毛细吸附进入而影响进样量的性。样品管中溶液少为5μL,进样体积为1~50nL。
2、进样时间以短为宜:通常进样时间为0.5~1s,此时粘附的样品量相对于吸入的体积可忽略不计。虽然电泳的进样时间可至±0.1s,但由于插入样品管时不可避免地会粘附一些溶液,进样时间过短会影响分析的重复性。
3、样品预浓缩:受总体积的制约,对于浓度很稀的样品,高电压电泳仪不能象HPLC那样可加大进样量来提高检测灵敏度,但可采取一些措施来改善。