Eaivelly透明八联管用户指南

——适用于荧光定量PCR的高性能实验耗材

一、产品概述

Eaivelly透明八联管（货号：EA0202-2）是一款专为荧光定量PCR（qPCR）设计的高精度实验耗材，采用超薄壁聚丙烯（PP）材质，搭配光学平盖，兼容Roche480、ABI7500、Bio-Rad CFX96等主流PCR仪器。其核心优势包括：

• 超薄壁设计：热传导效率提升20%，控温精度达±0.1℃，显著缩短实验循环时间。

• 无菌保障：经γ射线辐照灭菌，无DNase/RNase、无热源、无内毒素，避免样本污染。

• 光学性能：透明平盖透光率≥95%，确保荧光信号采集无衰减。

二、技术参数

三、操作指南

1. 样本制备

• 提取DNA/RNA后，使用Nanodrop检测浓度，确保模板浓度在10-100 ng/μL范围内。

• 避免反复冻融样本，建议分装后-80℃保存。

2. 试剂混合

• 按实验需求配制PCR反应体系（如2×SYBR Green Master Mix、引物、模板DNA），涡旋混匀后离心。

• 引物设计需避免二聚体形成，建议Tm值相差≤2℃。

3. 加样与密封

• 使用8道移液器将20 μL反应体系均匀分配至八联管各孔，避免气泡产生。

• 轻压光学平盖至贴合，确保密封性。

4. PCR程序设置

• 预变性：95℃ 5分钟

• 循环阶段：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40个循环）

• 溶解曲线：60℃→95℃，每0.5℃采集一次荧光信号

5. 数据分析

• 使用Bio-Rad CFX Manager或Roche LightCycler软件分析Ct值和熔解曲线。

• 阈值设定建议为基线标准差的10倍。

四、应用场景

• 基因表达分析：如miRNA、lncRNA的定量检测。

• 病原体检测：新冠、流感病毒核酸的荧光定量PCR。

• 分子诊断：肿瘤标志物（如KRAS、EGFR）突变筛查。

五、质量验证

1. 兼容性测试

• 在Roche480和ABI7500仪器上分别运行标准曲线实验，Ct值偏差≤0.3。

2. 热传导性能

• 与普通八联管对比，Eaivelly八联管在95℃变性阶段升温速率提升15%（数据来源：上海易汇生物实验室）。

3. 无菌验证

• 经第三方机构检测，无菌率达100%，无DNase/RNase残留。

六、注意事项

1. 防止污染

• 实验前使用75%乙醇擦拭操作台面，避免使用含氯消毒剂。

• 移液器吸头需使用带滤芯的型号。

2. 避免交叉污染

• 不同样本间更换移液器枪头，禁止重复使用。

• 光学平盖不可重复使用，每次实验需更换新管。

3. 储存条件

• 未开封的八联管需避光保存于干燥环境，避免高温高湿。

七、常见问题解答

• Q：荧光信号强度偏低如何解决？
  A：检查光学平盖是否贴合紧密，或更换透光率更高的品牌耗材。

• Q：出现非特异性扩增如何优化？
  A：提高退火温度至62-65℃，或调整引物浓度至0.2-0.4 μM。

八、供应商信息

• 公司名称：上海易汇生物科技有限公司

• 代理政策：支持区域代理，提供市场推广资料及试用装支持。

通过本指南，科研人员可高效利用Eaivelly透明八联管开展荧光定量PCR实验，确保数据准确性和重复性。如需进一步技术支持，请联系供应商获取定制化解决方案。