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不同类型的指示剂在SDS-PAGE电泳中的迁移情况有何差异?
溴酚蓝
迁移速度:溴酚蓝的分子量较小,在 SDS - PAGE 电泳中迁移速度较快。通常在 10% - 12% 的聚丙烯酰胺凝胶中,它的迁移位置大致相当于 3 - 5 kDa 的蛋白质。
颜色变化:溴酚蓝在碱性条件下呈蓝色,在酸性条件下呈黄色。在电泳过程中,由于凝胶环境通常为碱性,所以它一直保持蓝色,便于观察电泳的进程。
二甲苯青 FF
迁移速度:二甲苯青 FF 的分子量比溴酚蓝大,迁移速度较慢。在相同浓度的聚丙烯酰胺凝胶中,它的迁移位置大约相当于 40 - 50 kDa 的蛋白质。
颜色变化:二甲苯青 FF 通常呈现蓝色,在电泳过程中颜色相对稳定,也是通过其在凝胶中的位置来指示电泳的进度。
银染指示剂
迁移速度:银染指示剂并非传统意义上在电泳过程中实时观察的指示剂,而是用于在银染步骤中帮助判断染色和脱色程度。它一般与蛋白质样品一起电泳,但在电泳过程中其迁移情况并不作为实时监测指标。
颜色变化:在银染过程中,银染指示剂会与银离子发生反应,通常会先于蛋白质条带显色,帮助实验者判断染色时间。在脱色过程中,它也会先于蛋白质条带褪色,可作为脱色终止的参考,其颜色变化从深色(如棕色或黑色)逐渐变为无色。
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