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UElandy PCR 清洁试剂盒：分子生物学研究的得力助手

更新时间：2025-06-19 点击次数：44

在分子生物学研究领域，PCR 技术作为核心工具，广泛应用于基因扩增、疾病诊断、法医鉴定等诸多方面。然而，PCR 反应结束后，产物中往往混杂着未反应的引物、dNTPs、酶以及盐离子等杂质，这些杂质会严重干扰后续实验的准确性与可靠性，如在测序、克隆、酶切等实验中，可能导致结果偏差甚至实验失败。因此，高效、精准地纯化 PCR 产物成为分子生物学实验流程中至关重要的环节。UElandy PCR 清洁试剂盒应运而生，凭借其的性能，为科研工作者提供了便捷、可靠的 PCR 产物纯化解决方案。

一、技术原理

UElandy PCR 清洁试剂盒主要基于硅胶膜吸附技术。在 PCR 反应液中加入特定的结合缓冲液（Buffer PCR - A），其中含有的离液盐成分可破坏核酸分子的水化层，使 DNA 双链解旋并处于单链状态，同时降低溶液中各种分子的表面张力，促使 DNA 与硅胶膜发生特异性吸附。在合适的条件下，PCR 产物中的 DNA 片段能够牢固地结合到硅胶膜上，而引物、dNTPs、酶以及盐离子等杂质则随废液被去除。经过多次洗涤步骤，使用洗涤缓冲液（Buffer W2）进一步清除残留杂质，最后通过低离子强度的洗脱缓冲液（Eluent）或无菌水，改变 DNA 与硅胶膜之间的相互作用力，使纯化后的 DNA 从硅胶膜上洗脱下来，从而获得高纯度的 PCR 产物。

二、产品组成与特点

（一）产品组成

Buffer PCR - A：DNA 结合溶液，其配方能够有效促使 PCR 产物中的 DNA 与硅胶膜结合，确保高效捕获目标 DNA 片段。

Buffer W2 concentrate：去盐液，使用前需按试剂瓶上指定体积加入无水乙醇（可用无水乙醇或 95% 乙醇）进行稀释。稀释后的 Buffer W2 可有效去除结合在硅胶膜上的盐分及其他小分子杂质，保证 DNA 的纯度。

Eluent：洗脱液，成分为 2.5 mM Tris - HCl，pH 8.5。该洗脱液能够在不影响 DNA 稳定性的前提下，温和地将 DNA 从硅胶膜上洗脱下来，为后续实验提供纯净的 DNA 样本。

（二）产品特点

高纯度纯化：通过优化的硅胶膜吸附与洗涤流程，UElandy PCR 清洁试剂盒能够高效去除 PCR 产物中的引物、dNTPs、酶以及盐离子等杂质，使纯化后的 DNA A260/A280 比值通常处于 1.7 - 1.9 之间，满足各种对 DNA 纯度要求的下游实验需求，如高精度测序、复杂的克隆实验等。

高回收率：对于不同长度的 PCR 片段（涵盖 50 bp - 20 kb 的广泛范围），该试剂盒均能实现高回收率，一般可达 70% - 95%。即使对于短至 50 bp 的小片段 DNA，也能保证较高的回收效率，减少珍贵样本的损失，确保实验数据的完整性和可靠性。

操作便捷：试剂盒提供了负压法和离心法两种操作方式，用户可根据自身实验设备与操作习惯灵活选择。无论是在配备负压装置的高通量实验室，还是主要依靠离心机的常规实验室，都能轻松完成 PCR 产物的纯化工作。整个操作流程简单明了，无需复杂的技术培训，即可快速上手，显著提高实验效率。

兼容性强：适用于多种 PCR 反应体系及不同来源的 PCR 产物，无论是常规 PCR、巢式 PCR，还是实时荧光定量 PCR 产生的产物，都能进行有效的纯化。同时，该试剂盒与后续多种分子生物学实验技术高度兼容，纯化后的 DNA 可直接用于限制性酶切、连接反应、分子杂交以及自动化荧光测序等实验，为科研工作者构建了顺畅的实验流程。

高通量处理：采用 96 孔板形式的 DNA 制备板，特别适合高通量实验需求。在大规模的基因筛查、临床样本检测等实验中，能够同时处理大量样本，大大缩短实验时间，提高实验通量，降低实验成本。

三、操作流程

（一）负压法操作步骤

准备工作：正确连接负压装置，将 96 孔 DNA 制备板置于负压装置上。同时，确保 Buffer W2 concentrate 已按要求加入无水乙醇并混合均匀。

结合反应：在 PCR、酶切、酶标或测序反应液中，加入 3 倍体积的 Buffer PCR - A（若 Buffer PCR - A 不足 100 μl，则需加至 100 μl）。充分混合均匀后，将混合液转移到 96 孔 DNA 制备板中。开启负压装置，并调节负压至 - 25 - 30 英寸汞柱，缓慢吸掉板中的溶液，使 DNA 牢固结合在硅胶膜上。

洗涤步骤：向 96 孔 DNA 制备板中加入 0.3 ml Buffer W2，再次开启负压吸尽管中溶液。重复此洗涤步骤两次，以去除杂质。

干燥处理：保持负压状态，将 96 孔 DNA 制备板抽吸 10 min，尽量去除残留液体。然后，将导流管朝下，将 96 孔 DNA 制备板在长纤维性纸巾上用力拍击 6 次，进一步去除可能残留的液体。

洗脱 DNA：将 96 孔 DNA 制备板置于 96 孔 V 型底板上，在膜正中央加入 25 - 30 μl 水或 Eluent，室温静置 1 min，使洗脱液充分浸润硅胶膜。随后，以 3000 x g 离心 5 min，将纯化后的 DNA 洗脱到 V 型底板中。

（二）离心法操作步骤

结合反应：在 PCR、酶切、酶标或测序反应液中，加入 3 倍体积的 Buffer PCR - A（若 Buffer PCR - A 不足 100 μl，则需加至 100 μl），充分混匀。将混合液转移到 96 孔 DNA 制备板中，然后将 96 孔 DNA 制备板置于 96 孔 1.6 ml 深孔板中，以 1000 x g 离心 1 min，弃去滤液，使 DNA 结合在硅胶膜上。

洗涤步骤：向 96 孔 DNA 制备板中加入 0.3 ml Buffer W2，以 1000 x g 离心 1 min，弃去滤液。重复此洗涤步骤一次，确保杂质被充分去除。

干燥处理：将 96 孔 DNA 制备板再次置于 96 孔 1.6 ml 深孔板中，以 3000 x g 离心 10 min，尽可能去除残留液体。

洗脱 DNA：将 96 孔 DNA 制备板置于洁净的 96 孔 V 型底板中，在膜正中央加入 25 - 30 μl 水或 Eluent，室温静置 1 min。最后，以 3000 x g 离心 5 min，将纯化后的 DNA 洗脱到 V 型底板中。

注意事项：在操作过程中，应严格按照试剂盒说明书进行试剂的添加与操作条件的控制。例如，Buffer W2 concentrate 在使用前必须准确加入无水乙醇；洗脱时，若将洗脱液或水加热至 65℃，有利于提高洗脱效率；由于 DNA 分子呈酸性，建议将纯化后的 DNA 保存在 2.5 mM Tris - HCl，pH 8.5 的洗脱液中，以维持 DNA 的稳定性。

四、应用案例

（一）基因测序

在二代基因测序实验中，PCR 扩增是获取足够量目标 DNA 片段的常用手段。然而，扩增产物中的杂质会严重影响测序的准确性和读长。使用 UElandy PCR 清洁试剂盒对 PCR 产物进行纯化后，可有效去除引物二聚体、未反应的 dNTPs 等杂质，为测序反应提供高纯度的 DNA 模板。经实际应用验证，使用该试剂盒纯化后的 PCR 产物进行测序，测序峰图清晰，背景噪音低，读长显著提高，能够准确解读基因序列信息，为基因功能研究、遗传疾病诊断等提供可靠的数据支持。

（二）分子克隆

在构建重组质粒的分子克隆实验中，需要将 PCR 扩增得到的目的基因片段与载体进行连接。PCR 产物中的杂质可能会干扰连接反应的效率，导致重组质粒构建失败。利用 UElandy PCR 清洁试剂盒对 PCR 产物进行纯化，可确保目的基因片段的高纯度。纯化后的基因片段与载体连接效率大幅提升，转化大肠杆菌后，阳性克隆率显著增加。通过对阳性克隆的筛选与鉴定，成功构建了多种重组质粒，为后续基因表达、蛋白质功能研究等实验奠定了坚实基础。

（三）SNP 分析

单核苷酸多态性（SNP）分析在遗传学研究、药物基因组学等领域具有重要意义。在基于 PCR 技术的 SNP 分析实验中，PCR 产物的纯度直接影响 SNP 位点的准确识别。UElandy PCR 清洁试剂盒能够高效去除 PCR 产物中的杂质，保证 SNP 分析结果的可靠性。在对大量样本进行 SNP 分析时，该试剂盒的高通量处理能力得以充分发挥，可同时对 96 个样本进行 PCR 产物纯化，大大提高了分析效率，为大规模遗传关联研究提供了有力工具。

五、市场竞争优势

在 PCR 清洁试剂盒市场中，竞争激烈，众多品牌纷纷推出各自的产品。然而，UElandy PCR 清洁试剂盒凭借其优势脱颖而出。与部分竞争对手产品相比，UElandy 试剂盒在纯度和回收率方面表现更为出色。一些同类产品在去除杂质时可能会导致 DNA 的部分损失，使得回收率较低，且难以有效去除引物二聚体等顽固杂质，影响后续实验。而 UElandy PCR 清洁试剂盒通过优化的硅胶膜吸附与洗涤体系，在保证高回收率的同时，实现了更高水平的杂质去除，为用户提供了质量更优的纯化 DNA 样本。

在操作便捷性上，UElandy 提供的负压法和离心法两种操作方式，相比某些仅支持单一操作方式的试剂盒，更能满足不同实验室的设备条件和用户操作习惯。对于高通量需求的用户，其 96 孔板设计以及高效的操作流程，能够显著提高实验通量，降低时间成本。此外，UElandy 作为品牌，背后有专业的研发与技术支持团队，能够及时响应用户在使用过程中遇到的问题，为用户提供的技术指导与售后服务，这也是其在市场竞争中的一大优势。

UElandy PCR 清洁试剂盒以其先进的技术原理、的产品性能、便捷的操作流程以及广泛的应用范围，成为分子生物学研究中的重要工具。无论是在科研院校的基础研究，还是在生物技术企业的产品研发、临床诊断机构的样本检测等领域，都能为用户提供高效、可靠的 PCR 产物纯化解决方案，助力科研工作者突破实验瓶颈，推动生命科学研究不断向前发展。

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