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Western 及 IP 裂解液的实际应用案例

更新时间:2025-08-14      点击次数:58
癌症研究中的蛋白表达分析
在探究乳腺癌细胞中特定致癌基因的表达调控机制时,研究人员运用 Western 及 IP 裂解液对乳腺癌细胞系进行处理。通过使用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解液,在低温环境下裂解细胞,有效防止了蛋白质的降解和修饰,确保所提取蛋白质的完整性与活性。经裂解、离心获取细胞总蛋白后,利用 Western Blot 技术分析目标致癌蛋白的表达水平。实验结果显示,相较于正常乳腺细胞,乳腺癌细胞中该致癌蛋白的表达量显著上调,且其磷酸化修饰程度也发生明显改变。这一成果为深入理解乳腺癌的发病机制提供了关键线索,为后续开发针对该致癌蛋白的靶向治疗药物奠定了基础。
神经科学领域的蛋白质相互作用研究
科研团队在研究神经退行性疾病(如阿尔茨海默病)相关蛋白的相互作用网络时,IP 裂解液发挥了重要作用。以研究 β - 淀粉样蛋白(Aβ)与 tau 蛋白的相互关系为例,实验人员首先使用温和型 IP 裂解液处理神经元细胞或脑组织样本。这种裂解液能够在保持蛋白质天然构象的前提下,破坏细胞结构,释放细胞内蛋白。随后,利用针对 Aβ 蛋白的特异性抗体进行免疫沉淀实验,从复杂的蛋白混合物中富集与 Aβ 相互作用的蛋白质,其中就包括 tau 蛋白。通过对免疫沉淀复合物的进一步分析,发现 Aβ 与 tau 蛋白的异常结合会导致 tau 蛋白过度磷酸化,进而促进神经纤维缠结的形成,这一关键发现为揭示阿尔茨海默病的病理进程提供了重要依据,有助于开发新的治疗策略来阻断这一有害的蛋白相互作用过程。
免疫学研究中的抗体开发与鉴定
在开发针对新型病原体的单克隆抗体过程中,Western 及 IP 裂解液用于筛选和鉴定具有高特异性和亲和力的抗体。研究人员将病原体感染细胞或表达病原体相关抗原的细胞作为研究对象,采用 Western 裂解液裂解细胞,获得包含病原体抗原的总蛋白提取物。通过 Western Blot 实验,将不同克隆的单克隆抗体与总蛋白提取物进行反应,筛选出能够特异性识别目标抗原的抗体克隆。同时,利用 IP 裂解液进行免疫沉淀实验,验证筛选出的抗体与抗原在细胞内环境中的真实结合能力,进一步评估抗体的质量和有效性。经过多轮筛选和鉴定,成功获得了针对该病原体关键抗原的高效单克隆抗体,为后续的免疫诊断试剂开发和疫苗研究提供了有力工具。



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