详细介绍
品牌 | 其他品牌 | 供货周期 | 现货 |
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主要用途 | 实验室科研单位使用 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药,综合 |
Cyclic-Di-GMP AssayKit Catalog Number: 200-100
Cyclic-Di-GMP AssayKit Catalog Number: 200-100
Lucerna, Inc. 是一家生物技术工具公司,专注于开发和商业化荧光适体 (Spinach™) 技术,其目的是:1.) 提供即插即用的 RNA 成像和检测系统作为研究试剂,2.) 开发高- 通量筛选平台,以实现以前难以处理的目标的新药物发现,以及 3.) 开发用于工业生产应用的荧光传感器。
lucernatechnologies 200-100说明书
Cyclic-di-GMP Assay
用于测量细胞中环二鸟苷酸 (c-di-GMP) 水平的均质荧光测定。
检测说明
环二鸟苷单磷酸 (c-di-GMP) 检测是一种简单的混合读取、高选择性、HTS 就绪检测,用于测量细胞中的 c-di-GMP 水平。这种均相测定可用于检测任何产生 c-di-GMP 的生化或酶促反应中的 c-di-GMP,或用于监测细胞内 c-di-GMP 浓度的细胞应用。
测定原理
荧光信号的演变取决于 c-di-GMP 与传感器中 c-di-GMP 核糖开关的初始结合。这导致菠菜TM适体的稳定,进而结合 DFHBI-1T 以产生荧光。可以使用 GFP/FITC 滤光片组或 482nm 激发和 505nm 发射来测量荧光。
便于使用
c-di-GMP 检测易于使用且均质。只需将您的样品与提供的检测试剂一起孵育 30 分钟,然后在带有 FITC/GFP 滤光片或激发波长 482nm 和发射波长 505nm 的荧光读板机上读取样品。
快速响应和良好的信号稳定性
c-di-GMP 传感器在检测 c-di-GMP 时会迅速产生信号,因此可以进行快速测量。荧光信号随着时间的推移是稳定的,因此允许样品的批处理模式。早在测定设置的 30 分钟即可获得出色的 HTS 参数,并在很长一段时间内保持高水平。
宽动态范围
该检测即使在 50nM 的 c-di-GMP 下也很灵敏,并且具有宽广的动态范围。
选择性
c-di-GMP 传感器对 c-di-GMP 具有高度选择性,不受常见反配体的干扰。
即使与过量 500 – 1,000 倍的反配体(例如 GMP、pGpG 和 c-AMP-GMP)相比,该测定也实现了出色的 HTS 测定参数(Z 因子 >0.9)。
与基于细胞的检测的兼容性
c-di-GMP 测定可用于以均质形式测量细菌中的细胞内 c-di-GMP 浓度,无需造粒、裂解或洗涤步骤。只需用 BC 试剂补充含有细菌培养物的测定缓冲液,添加传感器和荧光团,孵育 30 分钟,然后在荧光阅读器上读取。
细菌中的 c-di-GMP 估计
表达野生型 WspR(来自铜绿 假单胞菌的二鸟苷酸环化酶)的大肠杆菌细胞用*、二甲基甲酰胺/DMF(载体)处理或不处理(对照)。此外,还以不同的细胞密度接种细菌以模拟不同的 c-di-GMP 水平。在 96 孔板中生长的细菌细胞中的 Cyclic-di-GMP 浓度在没有任何沉淀、洗涤、裂解或有机提取的情况下进行测量。
c-di-GMP 测定显示细菌中 c-di-GMP 浓度的变化,以响应抗生素处理和不同细菌细胞密度。
该产品被引用于:
凝聚素通过控制表型程序对铜绿假单胞菌角膜毒力至关重要。赵和等。生物Rxiv。2021。
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