Bio-Rad 1658033 小型垂直电泳转印系统用户指南

Bio-Rad 1658033 小型垂直电泳转印系统用户指南

——精准蛋白与核酸分析的一体化解决方案

一、系统概述

Bio-Rad 1658033 是专为实验室小型化研究设计的垂直电泳转印系统，集成 Mini-PROTEAN® Tetra 电泳槽（1658001）、PowerPac Basic 基础电源（1645050） 和 Mini Trans-Blot® 转印模块（1703935），可实现 蛋白质分离（SDS-PAGE/Native PAGE）、核酸电泳 及 Western Blot 转印 全流程操作。系统采用紧凑设计，兼容预制胶与手工灌胶，适用于蛋白纯度鉴定、分子量测定及下游分析。

二、核心组件与技术参数

三、系统优势

1. 高效分离与转印

• 1 小时内完成 4 块凝胶电泳，支持 SDS-PAGE 和 Native PAGE 多种模式。

• Mini Trans-Blot® 模块 配备 Bio-Ice 冷却装置，确保转印过程中温度稳定，减少蛋白降解。

2. 灵活兼容性

• 支持 Bio-Rad 预制胶（如 Mini-PROTEAN® TGX）与手工灌胶，适配实验室不同需求。

• 平行排列的灌胶架可同时制备两块凝胶，弹簧杠杆设计保证密封性。

3. 用户友好设计

• 透明电泳槽便于实时观察实验进程，防漏设计避免缓冲液泄漏。

• 模块化组件易于拆卸清洗，降低维护成本。

四、操作流程

（一）电泳操作

1. 凝胶制备

• 选择合适厚度的玻璃板（10.1 × 7.3 cm 或 10.1 × 8.2 cm），使用制胶夹固定。

• 注入分离胶与浓缩胶，插入梳子（孔宽 3.35–12.70 mm），室温聚合 30 分钟。

2. 样品上样

• 拔除梳子，用移液器加入 10–20 μL 样品（如蛋白 Marker、蛋白样品）。

• 加入电泳缓冲液至刻度线，盖上电泳槽盖。

3. 电泳运行

• 设置电源参数（如 120 V 恒压，30–60 分钟），启动电泳。

• 溴酚蓝迁移至凝胶底部时停止电泳。

（二）转印操作

1. 凝胶处理

• 电泳结束后，取出凝胶，切除浓缩胶，保留分离胶。

• 将凝胶浸泡于转印缓冲液中平衡 10 分钟。

2. 转印夹组装

• 按顺序放置海绵垫、滤纸、凝胶、PVDF 膜（预湿）、滤纸、海绵垫，形成“三明治"结构。

• 插入转印夹，红色电极对应正极，黑色电极对应负极。

3. 转印运行

• 设置转印参数（如 300 mA 恒流，60 分钟），启动转印。

• 转印结束后，取出 PVDF 膜，进行封闭与抗体孵育。

五、应用场景

1. 蛋白质组学研究

• 分离复杂蛋白混合物，分析蛋白表达差异（如 Western Blot 验证）。

2. 分子生物学实验

• 检测 DNA 片段大小（琼脂糖凝胶电泳）、PCR 产物纯化。

3. 药物研发

• 评估蛋白纯度与活性，支持抗体药物开发。

4. 教学实验

• 适用于高校生物化学与分子生物学课程，帮助学生掌握电泳与转印技术。

六、维护与注意事项

1. 日常维护

• 电泳槽与缓冲液槽可单独拆卸，使用超纯水清洗，避免残留盐结晶。

• 定期检查电源线与电极丝，确保导电性良好。

2. 安全规范

• 操作时佩戴手套，避免缓冲液接触皮肤与眼睛。

• 禁止空载运行电源，防止过热损坏。

3. 故障排查

• 电泳速度异常：检查缓冲液浓度与电压设置。

• 转印效率低：确认转印膜与凝胶接触紧密，调整转印时间与电流。